[发明专利]人副流感I型病毒大规模培养的方法在审

专利信息
申请号: 201810818654.3 申请日: 2018-07-24
公开(公告)号: CN108893451A 公开(公告)日: 2018-11-27
发明(设计)人: 周伟伟;周雷鸣;孙静静;赵巧辉;李桂林;付光宇;吴学炜 申请(专利权)人: 郑州伊美诺生物技术有限公司
主分类号: C12N7/00 分类号: C12N7/00
代理公司: 郑州异开专利事务所(普通合伙) 41114 代理人: 王霞
地址: 450016 河南省郑州市*** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明公开了一种人副流感I型病毒大规模培养的方法,首先将人副流感I型病毒按0.001~0.01MOI接种于长满单层的Vero细胞上,然后于37℃、5%CO2培养;每天采用ELISA法检测上清中病毒效价,绘制病毒增殖曲线;至第7天,收取病毒培养上清,使用胰酶消化液消化细胞,按1:4‑5进行带毒细胞的传代扩增,然后于37℃、5%CO2培养;重复收取病毒液,重新添加病毒培养液,或重复进行带毒细胞的传代扩增至所需规模。本发明在第7天进行带毒细胞的传代扩增,此时病毒效价高,细胞活率较好,减少了细胞制备量,缩短了培养时间,提高了工作效率;同时本发明按1:4‑5进行带毒细胞的传代扩增,无需重新接毒,可根据需要扩大规模,满足了对人副流感I型病毒疫苗进行深入研究和制造的需求。
搜索关键词: 传代 细胞 流感 扩增 大规模培养 病毒效价 病毒 病毒培养液 胰酶消化液 病毒培养 病毒疫苗 病毒增殖 工作效率 细胞制备 病毒液 重复 单层 接种 绘制 消化 检测 制造 研究
【主权项】:
1.一种人副流感I型病毒大规模培养的方法,其特征在于:包括下述步骤:第一步,将人副流感I型病毒按0.001~0.01MOI接种于长满单层的Vero细胞上,然后于37℃、5%CO2培养;第二步,接种后,每天采用ELISA法检测上清中病毒效价,绘制病毒增殖曲线;第三步,培养至第7天,收取病毒培养上清,使用胰酶消化液消化细胞,按1:4‑5进行带毒细胞的传代扩增,然后于37℃、5%CO2培养;第四步,重复第二步收取病毒液,重新添加病毒培养液,或重复第三步进行带毒细胞的传代扩增至所需规模。
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