[发明专利]标准曲线法荧光定量PCR鉴定牛转基因拷贝数的方法及引物有效
| 申请号： | 201810821611.0 | 申请日： | 2018-07-24 |
| 公开（公告）号： | CN108676855B | 公开（公告）日： | 2021-09-28 |
| 发明（设计）人： | 赵丽霞;王子馨;赵高平;李喜和 | 申请（专利权）人： | 内蒙古赛科星家畜种业与繁育生物技术研究院有限公司;内蒙古赛科星繁育生物技术（集团）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 011517 内蒙古自治区呼和浩特市*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种标准曲线法荧光定量PCR鉴定牛转基因拷贝数的方法及引物。它是利用实时荧光定量PCR法，以已经构建完成的转牛源四因子Oct4、Sox2、Klf4、cMyc牛体细胞(转基因型)及未转牛源4因子Oct4、Sox2、Klf4、cMyc牛体细胞(野生型)为检测对象。分别检测已转牛源四因子Oct4、Sox2、Klf4、cMyc牛体细胞(转基因型)及未转牛源4因子Oct4、Sox2、Klf4、cMyc牛体细胞(野生型)，可直接检出待测样品其是否转入牛源4因子Oct4、Sox2、Klf4、cMyc基因及其转基因拷贝数。为转基因牛遗传稳定性筛选实验奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 标准 曲线 荧光 定量 pcr 鉴定 转基因 拷贝 方法 引物 | ||
【主权项】：
1.一种标准曲线法荧光定量PCR鉴定牛转基因拷贝数的引物，其特征在于，包括内参基因GAPDH荧光定量PCR反应使用的引物对SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2、待测基因Oct4、Sox2、Klf4、cMyc荧光定量PCR反应使用的引物对SEQ ID NO.3～SEQ ID NO.10，引物设计参数为引物长度18‑25bp，Tm55‑65℃，其中每对检测引物的上游引物Tm值和下游引物Tm值相差不大于4℃，产物大小为100‑300bp。
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