[发明专利]甲醇生物转化菌株的构建方法以及构建的菌株和应用在审
申请号: | 201810826759.3 | 申请日: | 2018-07-25 |
公开(公告)号: | CN110760536A | 公开(公告)日: | 2020-02-07 |
发明(设计)人: | 郑平;王钰;孙际宾;凡立稳;T·菲利伯特;马延和 | 申请(专利权)人: | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/75;C12N15/77;C12N1/21;C12P7/04;C12R1/19;C12R1/15;C12R1/125 |
代理公司: | 31266 上海一平知识产权代理有限公司 | 代理人: | 崔佳佳;徐迅 |
地址: | 300308 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了构建甲醇快速利用菌株的方法,首先构建甲醇和木糖强制共利用的基础菌株。其次以甲醇和木糖为碳源对上述基础菌株进行适应性进化,获得生长速度显著加快的菌株。最后增强菌株中核酮糖‑5‑磷酸的下游代谢途径相关酶的活性。本发明还公开了构建的甲醇生物转化菌株以及利用所述菌株进行甲醇生物转化的方法。利用本发明的菌株能够以甲醇和木糖为碳源,甚至以甲醇为唯一碳源进行甲醇生物转化,并且甲醇的转化效率显著提高。本发明还公开了本发明菌株中一些酶的突变体,以及利用这些突变体进行甲醇生物转化的方法。 | ||
搜索关键词: | 甲醇 菌株 生物转化 构建 木糖 突变体 生物转化菌株 代谢途径 发明菌株 唯一碳源 转化效率 核酮糖 磷酸 进化 生长 | ||
【主权项】:
1.一种甲醇生物转化菌株的构建方法,所述方法包括以下步骤:/n1)构建甲醇和木糖强制共利用的基础菌株,其特征包括但不限于:A、增强所述菌株中木糖代谢途径相关酶的活性或导入外源性的木糖代谢途径相关酶,B、减弱所述菌株中核酮糖-5-磷酸的下游代谢途径相关酶的活性,C、增强核酮糖单磷酸途径相关酶的活性;/n2)对上述基础菌株进行适应性进化,获得生长速度显著加快的菌株。所述的适应性进化使用不含葡萄糖,但含有甲醇和木糖为碳源的培养基;/n3)增强2)所述生长加快菌株中核酮糖-5-磷酸的下游代谢途径相关酶的活性。/n
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