[发明专利]提升大肠杆菌角鲨烯含量用质粒pCDAF及其制备和使用方法在审
| 申请号： | 201810835330.0 | 申请日： | 2018-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN108866089A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 徐文;姚佳;马茜;李薇;孙晓敬;汪洋 | 申请（专利权）人： | 西安医学院 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/66;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 西安弘理专利事务所 61214 | 代理人： | 罗笛 |
| 地址： | 710021 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提升大肠杆菌中角鲨烯含量的方法，具体通过增生大肠杆菌的内膜进行，本发明还公开了一种质粒pCDAF，通过大量表达ATP合酶b亚基基因atpF促使大肠杆菌内膜增生，本发明还公开了该质粒pCDAF的制备和使用方法。本发明的技术方案，通过表达ATP合酶b亚基基因atpF促使细胞内膜增生使角鲨烯及其合成前体物的储存空间增加，最终提高角鲨烯的积累量，通过质粒pCDAF用于促使大肠杆菌中内膜的增生，含有链霉素抗性基因作为筛选标记，以强启动子PT7控制ATP合酶b亚基基因atpF的表达以提高其表达量。 | ||
| 搜索关键词： | 大肠杆菌 角鲨烯 增生 质粒 内膜 基因 制备 链霉素抗性基因 储存空间 内膜增生 强启动子 筛选标记 细胞内膜 表达量 前体物 种质 合成 积累 | ||
【主权项】：
1.一种提升大肠杆菌中角鲨烯含量的方法，其特征在于，通过增生大肠杆菌的内膜进行；所述大肠杆菌为可合成角鲨烯的大肠杆菌E.coli CSQ1，所述大肠杆菌E.coli CSQ1是先通过将野生菌株E.coli C43(DE3)制备成氯化钙感受态细胞后，再通过热击法转化质粒pTsqs，最后利用氨苄青霉素抗性筛选和菌落PCR验证获得的，所述质粒pTsqs的核苷酸序列表如序列1所示。
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