[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒荧光LAMP引物组、试剂盒及检测方法在审
申请号: | 201810852188.0 | 申请日: | 2018-07-30 |
公开(公告)号: | CN108950072A | 公开(公告)日: | 2018-12-07 |
发明(设计)人: | 邵建宏;赵福振;曾俊霞;廖秀云;沙才华;罗宝正 | 申请(专利权)人: | 珠海出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 王国标 |
地址: | 519000 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供了一种猪流行性腹泻病毒荧光LAMP引物组、试剂盒及其检测方法。所述猪流行性腹泻病毒荧光LAMP试剂盒包括2×反应液12.5μL,内引物FIP、BIP 40μmol/L各1.0μL,环引物LF、LB 20μmol/L各1.0μL,外引物F3、B3 5μmol/L各1.0μL,Bst DNA聚合酶0.8μL,逆转录酶0.2μL,荧光染料0.5μL。所述试剂盒的检测方法,包括步骤:1)提取病毒核酸模板;2)将荧光LAMP反应体系与2.0μL的病毒核酸模板混合,补水至25μL,并加入20.0μL的封闭液;3)通过Real‑Time PCR System设定保温阶段63℃30s,1个循环;循环阶段63℃15s,63℃45s,40个循环;于63℃45s处收集荧光信号。其猪流行性腹泻病毒荧光LAMP检测试剂盒反应时间比Taqman荧光PCR法可缩短20min以上。 | ||
搜索关键词: | 荧光 试剂盒 猪流行性腹泻病毒 流行性腹泻 病毒核酸 种猪 检测 病毒 内引物FIP 保温阶段 环引物LF 逆转录酶 循环阶段 荧光染料 荧光信号 荧光PCR 封闭液 时间比 外引物 补水 | ||
【主权项】:
1.一种猪流行性腹泻病毒荧光LAMP引物组,包括引物FIP、BIP、F3、B3、LF和LB,各引物的序列如SEQ ID№1~6所示。
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