[发明专利]一种检测miRNA的方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201810869050.1 | 申请日： | 2018-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN109097446A | 公开（公告）日： | 2018-12-28 |
| 发明（设计）人： | 张芳;梁淑英;陈雨浓;陈雪雲;张晓婷;高飞 | 申请（专利权）人： | 福州大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6825 | 分类号： | C12Q1/6825;C12Q1/682 |
| 代理公司： | 福州科扬专利事务所 35001 | 代理人： | 林朝熙 |
| 地址： | 350108 福建省福州*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测miRNA的方法，包括：S1：提供特异性识别miRNA的DNA分子机器，所述DNA分子机器为包含G‑四链体序列的互补序列的一条核苷酸序列；S2：将所述DNA分子机器与待测样品相互识别；S3：引入DNA聚合酶和切口酶，作用于DNA分子机器；S4：引入硫黄素T，诱导产生G‑四链体结构并与G‑四链体结合，产生荧光；S5：记录荧光发光情况。所述DNA分子生成机器为一条核苷酸序列，包括从3’端到5’端依次排列的区域，即：miRNA序列识别区、稳定区、切口酶识别区和G‑四链体合成模板。本发明无需荧光探针标记，灵敏度更高，操作更简单。 | ||
| 搜索关键词： | 四链体 核苷酸序列 切口酶 识别区 种检测 生物技术领域 荧光探针标记 四链体结构 特异性识别 待测样品 合成模板 互补序列 依次排列 荧光发光 灵敏度 试剂盒 稳定区 引入 荧光 硫黄 诱导 记录 | ||
【主权项】：
1.一种检测miRNA的方法，其特征在于，其包括以下步骤：S1：提供特异性识别miRNA的DNA分子机器，所述DNA分子机器为包含G‑四链体序列的互补序列的一条核苷酸序列；S2：将所述DNA分子机器与待测样品混合；S3：引入DNA聚合酶和切口酶，作用于DNA分子机器，发生DNA新链合成、形成单链切口、不断剥离产生富G序列片段的系列反应；S4：引入硫黄素T，诱导富G序列片段产生G‑四链体结构并与G‑四链体结合，产生荧光；S5：记录荧光发光情况。
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