[发明专利]一种快速检测镰刀菌DNA的方法在审
| 申请号： | 201810869124.1 | 申请日： | 2018-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN108949915A | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 高飞;张晓婷;周琳;许娟;杜鹏强;张艳丽;谢源;李洪连 | 申请（专利权）人： | 河南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 福州科扬专利事务所 35001 | 代理人： | 林朝熙 |
| 地址： | 450003 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种快速检测镰刀菌DNA的方法，其包括以下步骤：S1：提供特异性识别镰刀菌DNA的DNA分子机器，所述DNA分子机器为一条包含G‑四链体互补序列的核苷酸序列；S2：将所述DNA分子机器与待测样品相互混合；S3：引入DNA聚合酶和切口酶，作用于DNA分子机器，发生DNA扩增反应；S4：引入硫黄素T，诱导产生G‑四链体结构，并与G‑四链体结合，产生荧光；检测和记录该荧光。本发明可将疑似含有镰刀菌DNA的小麦待测样品中的核酸信号转化为G‑四链体，在常温恒温下即可实现G‑四链体的不断扩增，将核酸的信号高度放大，通过硫黄素T结合G‑四链体产生稳定的荧光信号，从而实现高灵敏度的核酸快速定性分析测定。 | ||
| 搜索关键词： | 四链体 镰刀菌 待测样品 快速检测 荧光 核酸 硫黄 快速定性分析 核苷酸序列 四链体结构 特异性识别 常温恒温 高灵敏度 核酸信号 互补序列 荧光信号 引入 切口酶 扩增 诱导 放大 小麦 检测 记录 转化 | ||
【主权项】：
1.一种快速检测镰刀菌DNA的方法，特征在于，其包括以下步骤：S1：提供特异性识别镰刀菌DNA的DNA分子机器，所述DNA分子机器为一条包含G‑四链体互补序列的核苷酸序列；S2：将所述DNA分子机器与待测样品相混合；S3：引入DNA聚合酶和切口酶，作用于DNA分子机器，发生DNA新链合成、形成单链切口、不断剥离产生富G序列片段的系列反应；S4：引入硫黄素T，诱导富G序列片段产生G‑四链体结构，并与G‑四链体结合，产生荧光；S5：记录荧光发光情况。
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