[发明专利]一种高降解DNA测序文库的构建方法及其应用在审
| 申请号： | 201810870019.X | 申请日： | 2018-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN109055486A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 王进科;武剑 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C40B50/06 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 孙昱 |
| 地址： | 211189 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高降解DNA测序文库的构建方法及其应用，该构建方法是先将双链DNA 1变性，在得到的单链DNA 1的3′端连接单链接头，再用DNA聚合酶延伸连接单链接头的单链DNA 2使其成为双链DNA 2，然后向双链DNA 2无单链接头的一端连接标签T接头，成为双链DNA 3，最后用PCR扩增两端连接接头的双链DNA 3使其成为可测序文库。该方法极大的简化了基于ssDNA的NGS文库制备的过程，实现了低成本、高效率、高通量和低偏倚的高降解DNA测序文库构建，可用于高降解DNA片段测序分析。 | ||
| 搜索关键词： | 双链DNA 测序文库 构建 降解 单链 单链DNA 测序分析 连接接头 一端连接 低成本 高通量 高效率 变性 可用 偏倚 制备 文库 应用 标签 延伸 | ||
【主权项】：
1.一种高降解DNA测序文库的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1，将双链DNA 1变性，使其成为单链DNA 1；步骤2，在步骤1所得单链DNA 1的3′ 端连接单链接头，成为单链DNA 2；步骤3，用DNA聚合酶延伸步骤2所得单链DNA 2使其成为双链DNA 2；步骤4，向步骤3所得双链DNA 2无单链接头的一端连接标签T接头，成为双链DNA 3；步骤5，PCR扩增步骤4两端连接接头的双链DNA 3使其成为可测序文库。
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