[发明专利]一种监测空气中小麦白粉病菌的方法

摘要

本发明涉及小麦白粉病菌的监测方法，具体是一种监测空气中小麦白粉病菌的方法，包括以下步骤：A、前处理：使用改造的空气颗粒物综合采样器连续采集空气中的小麦白粉病菌，离心后使用试剂盒提取DNA并纯化，得到样品DNA；B、PCR扩增反应：以PCR引物对样品DNA进行PCR扩增；其中，上游引物为：5'‑AAGCTATGCGGAACTTCGTTT‑3'；下游引物为：5'‑TAAGGAGTTTTGGCAAGTCCC‑3'，通过本发明公开的技术手段成功检测到空气中的小麦白粉病菌，且该方法成本低、操作简便，为气传植物病原真菌的测报提供了一种新方法。

主权项

1.一种监测空气中小麦白粉病菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、前处理：使用改造的空气颗粒物综合采样器连续采集空气中的微生物，每周更换1次滤膜；完成采样的滤膜保存于灭菌的50mL离心管中，置于‑25‑18℃保存；在离心管中加15‑30mLPBS缓冲液，2‑6℃离心，控制离心力为200×g，离心2.5‑3.5小时；取离心后的液体600‑1000μL，使用试剂盒提取DNA并纯化，得到样品DNA；B、PCR扩增反应：以PCR引物对样品DNA进行多重PCR扩增；其中，上游引物为：5'‑AAGCTATGCGGAACTTCGTTT‑3'；下游引物为：5'‑TAAGGAGTTTTGGCAAGTCCC‑3'；所述PCR扩增反应体系的总体积为30ul，PCR扩增反应体系如下：PCR扩增条件：94℃预变性3min；94℃变性1min，58℃退火30s；72℃延伸1min，40个循环后，72℃彻底延伸10min，最后PCR扩增物在4℃条件下保存；C、电泳检测：PCR扩增反应结束后，PCR产物在1.5％的琼脂糖凝胶中电泳。