[发明专利]脑胶质瘤相关间充质干细胞亚群生物特性的检测方法有效
申请号: | 201810878554.X | 申请日: | 2018-08-03 |
公开(公告)号: | CN108982846B | 公开(公告)日: | 2022-02-08 |
发明(设计)人: | 付朋;赵洪洋;项炜;熊南翔;姜晓兵;张方成;张庆;易东晔;蔡晓立;薛冰洲 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学同济医学院附属协和医院 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;C12Q1/6876;G01N33/68;G01N33/574 |
代理公司: | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人: | 裴金华 |
地址: | 430000 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了脑胶质瘤相关间充质干细胞亚群生物特性的检测方法,该种方法通过对细胞亚群的建立和分离,以及体内和体外的检测试验,体外包括免疫荧光法、流式细胞术、ELISA实验、Transwell实验、CCK8测试、划痕试验、Adhesion assay和血管生成试验,通过多种手段和方向对细胞亚群的生物特性进行逐步确定,为肿瘤靶向治疗提供了非常好的技术支持和根据;同时通过基因技术对细胞亚群的RNA进行差异性检测,从而可以对治疗靶点的确定提供了很好的帮助。 | ||
搜索关键词: | 胶质 相关 间充质 干细胞 群生 特性 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.脑胶质瘤相关间充质干细胞亚群生物特性的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)脑胶质瘤相关间充质干细胞的CD90high和CD90low两种细胞亚群采用免疫磁珠分离实验进行体外筛选分离,培养,鉴定;(2)将脑胶质瘤相关间充质干细胞CD90high和CD90low两种细胞亚群分别进行体外检测,包括CCK8实验、Transwell 实验、细胞划痕实验、Adhesion assay和促内皮细胞成管实验;(3)将脑胶质瘤相关间充质干细胞CD90high和CD90low两种细胞亚群分别进行动物体内对比实验,包括肿瘤大小,动物生存期,肿瘤组织内Ki‑67和CD31表达;组织内CD90和CD105双标荧光免疫表达,生物信息学分析CD90表达和TCGA数据库内GBM患者预后;(4)将脑胶质瘤相关间充质干细胞CD90high和CD90low两种细胞亚群通过基因芯片技术进行差异性表达测试,同时通过ELISA实验对分泌生长因子进行测试。
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