[发明专利]一种液相芯片技术检测微生物的方法

摘要

本发明涉及一种液相芯片技术检测微生物的方法，包括以下步骤：S1，根据微生物基因序列设计合成对应的布鲁氏菌探针、沙门氏菌探针、狂犬病毒探针、弓形虫探针、巴氏通体探针和弯曲杆菌探针；S2，将S1中各探针分别与第一、第二、第三、第四、第五和第六荧光编码微球相连，分别获得第一、第二、第三、第四、第五和第六偶联微球的探针溶液；S3，将待测物样品，经DNA抽提和PCR扩增获得待测PCR产物，将待测PCR产物加入偶联微球的探针溶液，在Luminex仪器中读取信号，与阈值比较，判断待测物样品为阴性或阳性。从而获得了一种能同时快速有效检测多种微生物的高通量检测技术。

主权项

1.一种液相芯片技术检测微生物的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，根据布鲁氏菌、沙门氏菌、狂犬病毒、弓形虫、巴氏通体和弯曲杆菌的基因序列分别设计合成对应的具有5’端修饰有氨基的SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的布鲁氏菌探针、具有5’端修饰有氨基的SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列的沙门氏菌探针、具有5’端修饰有氨基的SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列的狂犬病毒探针、具有5’端修饰有氨基的SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列的弓形虫探针、具有5’端修饰有氨基的SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列的巴氏通体探针和具有5’端修饰有氨基的SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列的弯曲杆菌探针；S2，将布鲁氏菌探针、沙门氏菌探针、狂犬病毒探针、弓形虫探针、巴氏通体探针和弯曲杆菌探针分别与第一、第二、第三、第四、第五和第六荧光编码微球相连，分别获得第一、第二、第三、第四、第五和第六偶联微球的探针溶液；S3，将布鲁氏菌、沙门氏菌、狂犬病毒、弓形虫、巴氏通体和弯曲杆菌阴性样品，经DNA抽提和PCR扩增获得阴性PCR产物，将第一、第二、第三、第四、第五和第六偶联微球的探针溶液混合形成混合偶联微球的探针溶液，然后将阴性PCR产物加入混合偶联微球的探针溶液，在Luminex仪器中读取信号，根据该信号得阈值；S4，将待测物样品，经DNA抽提和PCR扩增获得待测PCR产物，将待测PCR产物加入混合偶联微球的探针溶液，在Luminex仪器中读取信号，与阈值比较，判断待测物样品为阴性或阳性。