[发明专利]热稳定胆固醇酯酶突变体OPE-S109

摘要

本发明提供热稳定胆固醇酯酶突变体OPE‑S109P/S271P及其制备方法，所述突变体序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用软件，结合突变体自由能的变化值，构建突变体电子文库；从结构合理的突变体中，筛选出突变位点位于β‑转角的突变体，进行分析：组成β‑转角氨基酸残基z_B‑factor的平均值大于零；组成β‑转角氨基酸残基z_RMSF的平均值大于零；突变位点所的β‑转角柔性值大于1；与热稳定蛋白β‑转角氨基酸偏好性相同。满足上述两个条件的突变体组成微型突变文库。利用上述方法构建所述突变体，阳性突变体频率为33.3%，有效降低筛选工作量；获得突变体的失活半衰期较野生型OPE延长了3.6倍。

主权项

1.热稳定胆固醇酯酶突变体OPE‑S109P/S271P，其特征在于：所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。