[发明专利]一种流感病毒HA融合肽和helix A蛋白制备方法及其应用与引物

摘要

本发明公开了一种流感病毒HA融合肽+helix A蛋白表达载体的制备方法及其应用与引物。本发明的原理和最核心的关键技术是科学地设计扩增出pGEX‑6p‑1线性化载体以及流感病毒HA融合肽‑helix A基因片段的引物，利用商品化的重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆HA融合肽‑helix A，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现流感病毒HA融合肽‑helix A蛋白与GST的融合表达，并获得纯化的HA融合肽‑helix A融合蛋白。

主权项

1.流感病毒HA融合肽和helix A蛋白制备用引物，包括：PCR扩增pGEX‑6p‑1线性化载体引物：SEQ ID NO.1上游引物：5‘taatgacggtgaaaacctctgacacatgc 3’；SEQ ID NO.2下游引物：5‘catgggcccctggaacagaacttccagat 3’；PCR扩增AIV病毒HA融合肽和helix A基因引物：SEQ ID NO.3上游引物：5‘GTTCCAGGGGCCCATGGGAAGCggcctatttggtgctat 3’；SEQ ID NO.4下游引物：5‘GTTTTCACCGTCATTAgtttaattttcctgt 3’。