[发明专利]人参黑斑菌-单管巢式PCR-核酸传感器的制备及其检测方法在审
| 申请号： | 201810916358.7 | 申请日： | 2018-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN108977501A | 公开（公告）日： | 2018-12-11 |
| 发明（设计）人： | 魏书琴;尹锐;卢广林;陈海蛟;李宛泽;冯立超 | 申请（专利权）人： | 吉林农业科技学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12Q1/6895;C12Q1/6848;G01N33/577;G01N33/569 |
| 代理公司： | 北京君泊知识产权代理有限公司 11496 | 代理人： | 王程远 |
| 地址： | 132101 吉林省吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明公开了人参黑斑菌‑单管巢式PCR‑核酸传感器的制备方法，包括以下步骤：A、制备人参黑斑菌真菌培养物；B、对培养物破碎并进行DNA提取；C、人参黑斑菌16S rRNA扩增；D、胶体金的制备；E、胶体金颗粒与链酶亲和素的结合；F、核酸传感器的制备与组装。所述的核酸传感器，由底板、硝酸纤维素膜、金标结合垫、样品垫和吸水纸五部分组成。本发明将单管巢式PCR‑核酸传感器相结合，建立了用于人参黑斑病的快速检测的方法。在优化的条件下，该方法对人参黑斑菌基因组DNA最低检出限为0.01pg；较常规PCR检测灵敏度提高了100倍。 | ||
| 搜索关键词： | 黑斑 核酸传感器 制备 人参 巢式PCR 单管 硝酸纤维素膜 底板 检测灵敏度 胶体金颗粒 金标结合垫 链酶亲和素 人参黑斑病 真菌培养物 基因组DNA 快速检测 常规PCR 检出限 胶体金 培养物 吸水纸 样品垫 扩增 破碎 组装 检测 优化 | ||
【主权项】：
1.人参黑斑菌‑单管巢式PCR‑核酸传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A、制备人参黑斑菌真菌培养物；B、对培养物破碎并进行DNA提取；C、人参黑斑菌16S rRNA扩增；D、胶体金的制备；E、胶体金颗粒与链酶亲和素的结合；F、核酸传感器的制备与组装。
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