[发明专利]基于环介导恒温扩增的丙型肝炎病毒基因分型方法在审
| 申请号： | 201810917403.0 | 申请日： | 2018-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN109097494A | 公开（公告）日： | 2018-12-28 |
| 发明（设计）人： | 刘子杰;段勇;杨川琪 | 申请（专利权）人： | 昆明医科大学第一附属医院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 650032 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明涉及公开一种基于环介导恒温扩增的丙型肝炎病毒基因分型方法，涉及分子生物技术领域。所述丙型肝炎病毒基因分型方法，基于LAMP方法，针对丙型肝炎病毒5’UTR‑Core区中各亚型特异的基因序列，设计不同亚型的LAMP引物，包括两条外引物、两条内引物和环引物，在65℃，60min条件下采用NEB试剂进行检测；具有高特异性、高灵敏度、低成本的特性，可实现标本高通量的自动化检测、可污染的风险，并且较低的设备要求可以有助于推广LAMP方法在临床的应用；具有较好的临床应用前景，同时可开发相应试剂有利于进一步推动本方法在临床的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 丙型肝炎病毒基因 分型 环介导恒温扩增 亚型 丙型肝炎病毒 分子生物技术 高灵敏度 基因序列 临床应用 设备要求 低成本 高通量 环引物 内引物 外引物 检测 应用 自动化 标本 污染 开发 | ||
【主权项】：
1.一种丙型肝炎病毒基因分型方法，其特征在于：基于LAMP方法，针对丙型肝炎病毒5’UTR‑Core区中各亚型特异的基因序列，设计不同亚型的LAMP引物，包括两条外引物、两条内引物和环引物，在65℃，60min条件下采用NEB试剂进行检测；所述反应体系为：12.5μL2×MasterMix、2.5μL引物混合液、1μLcDNA模板和9μLRnasefree水在基因扩增仪下反应；所述引物混合液两条外引物各5pmol、两条内引物各40pmol和环引物20pmol；所述反应体系从红色变为黄色时结果判断为阳性。
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