[发明专利]间充质干细胞的分离培养方法及相应的保存方法和无血清培养基在审
| 申请号： | 201810943142.X | 申请日： | 2018-08-17 |
| 公开（公告）号： | CN109161520A | 公开（公告）日： | 2019-01-08 |
| 发明（设计）人： | 吴海涛;沈政;列浦昌;聂惠蓉;黄春艳;施念 | 申请（专利权）人： | 北昊干细胞与再生医学研究院有限公司;冠昊生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;A01N1/02 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 林青中;万志香 |
| 地址： | 510630 广东省广州市黄埔区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种间充质干细胞的分离培养方法及相应的保存方法和无血清培养基。该间充质干细胞的分离培养方法及相应的保存方法，通过使用I型胶原酶和DNase I处理间充质干细胞组织，然后分离得到干细胞的单细胞悬液和未完全消化的组织块，分别接种，使用无血清干细胞培养基进行大规模干细胞的扩大培养，扩增结束后使用干细胞冻存保护剂进行液氮冻存。与传统方法相比，上述间充质干细胞的分离培养方法及相应的保存方法对整个干细胞组织的利用率更高，且细胞活力更高；使用无血清培养方法可以有效降低血清对干细胞后续应用的影响；使用高效的冻存保护剂，价格便宜，细胞活率高，可现配现用，简单可行。 | ||
| 搜索关键词： | 干细胞 分离培养 间充质干细胞 保存 充质干细胞 无血清培养 保护剂 冻存 无血清干细胞培养基 无血清培养基 单细胞悬液 扩大培养 细胞活力 液氮冻存 处理间 组织块 血清 扩增 种间 接种 细胞 消化 应用 | ||
【主权项】：
1.一种间充质干细胞的分离培养方法，其特征在于，包括如下步骤：向间充质干细胞组织中加入I型胶原酶溶液和DNase I溶液；将所述间充质干细胞组织切碎，过滤分离，分别收集干细胞消化液和未完全消化的组织块；洗涤所述干细胞消化液并离心，收集干细胞的单细胞沉淀；分别将所述干细胞的单细胞沉淀和未完全消化的组织块接种于无血清培养基中进行扩大培养。
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