[发明专利]一种制备矿化细胞外基质细胞微球的方法在审
| 申请号： | 201810950574.3 | 申请日： | 2018-08-20 |
| 公开（公告）号： | CN108998412A | 公开（公告）日： | 2018-12-14 |
| 发明（设计）人： | 刘燕;周彦恒;付翠翠;罗聃 | 申请（专利权）人： | 杭州恒睿生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京久维律师事务所 11582 | 代理人： | 邢江峰 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市杭州经济技术*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种制备矿化细胞外基质细胞微球的方法，其包括如下步骤：矿化液的准备、三维微球的制备、细胞微球的矿化以及材料补充手段，所述的一种制备矿化细胞外基质细胞微球的方法设计流程合理，其通过生物学培养的方法，进行三维矿化基质培养细胞微球，与传统的体外二维培养的细胞相比，本发明所培养的细胞包含了更多的细胞生物学信息，有很好的仿生模拟骨组织的形成过程，所述的一种制备矿化细胞外基质细胞微球的方法值得在生物医学领域推广与使用。 | ||
| 搜索关键词： | 微球 细胞 矿化 制备 细胞外基质 三维 细胞生物学 生物医学领域 生物学培养 材料补充 矿化基质 培养细胞 传统的 矿化液 模拟骨 二维 体外 | ||
【主权项】：
1.一种制备矿化细胞外基质细胞微球的方法，其包括如下步骤：矿化液的准备、三维微球的制备、细胞微球的矿化以及材料补充手段，其特征在于：所述矿化液的准备实施方式为将4.2mM的K2HPO4加入完全培养基形成矿化培养基A,将9mM的CaCl2和0.2mg/ml的聚天冬氨酸加入完全培养基中形成矿化培养基B；所述三维微球制备实施方式为将大鼠来源骨髓间充质干细胞(P3)接种于三维培养板中；所述细胞微球的矿化实施方式为：将三维培养板中的微球放置于矿化培养基进行培养；所述材料补充手段实施方式为采用扫描电镜(SEM)和能谱分析仪(EDX)观察不同细胞微球的微观形貌以及元素成分、采用原子力显微镜测量不同微球的力学性能、微球内细胞活性的检测、微球内细胞分布的检测以及通过成骨基因的表达分析微球的成骨能力。
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