[发明专利]一种快速评价柑橘溃疡病药剂药效的方法

摘要

本发明属于柑橘病害防治技术领域，尤其是一种快速评价柑橘溃疡病药剂药效的方法。一种快速评价柑橘溃疡病药剂药效的方法，包括如下步骤：(1)接种用主要器具准备；(2)柑橘溃疡病病叶采集；(3)柑橘健康离体叶片采集；(4)溃疡病叶片处置；(5)离体叶片处置；(6)接种病菌；(7)接种后药剂处置和(8)药剂后处置。本发明的方法所用器具简单，无高难度技术操作，简单易行；跳过细菌液准备阶段，缩短病菌接种时间，占用空间小；发病症状同田间症状一致，易识别，药剂防治效果差异显著，接种发病条件容易控制，容易实现技术方法的标准化。

主权项

1.一种快速评价柑橘溃疡病药剂药效的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)接种用器具的准备：用接种针、消毒剪刀、研钵、灭菌滤纸、溃疡病防治药剂和普通培养皿做接种用器具，培养皿规格视不同品种柑橘叶片大小而定，清洁消毒后备用；(2)柑橘溃疡病叶采集：选取明显溃疡病病症特征的叶片作为菌种来源，叶片发病病症特点是病灶部位周围有明显黄色菌圈，发病中期时病灶中心为木栓化，呈火山口开裂状；(3)柑橘健康离体叶片采集：选用叶片为本次梢期所生叶面积已展开至最大，颜色转绿的新叶，用消毒剪刀剪取与步骤(1)中相应培养皿规格大小近似的叶片作为供试材料；(4)溃疡病叶片的处置：将步骤(2)准备的溃疡病叶片表面进行清洗，采用75％酒精进行简单消毒，用消毒剪刀将叶片上病斑延菌圈分界处剪下，去掉中间木栓化病灶部，减少杂菌侵入，将剪下的菌圈叶片组织放入研钵，加入5mL无菌水，进行研磨后静置5min，吸取上清菌液，备用；(5)离体叶片的处置：打开步骤(1)备好的培养皿皿盖，将灭菌滤纸平铺在培养皿底部，取步骤(3)准备的离体叶片，用接种针在离体叶片正面选3个部位进行针刺处理，针头完全穿过叶片组织，每部位3针，每片叶共9针；(6)接种病菌：将步骤(1)准备的灭菌滤纸剪成圆或方形小片，吸足菌液后贴在3个针刺点为一组的部位上；(7)接种后药剂处置：配制步骤(1)准备的溃疡病防治药剂溶液，在接种1h后滴在所接种病菌的滤纸小片上，每纸片1滴，CK滴1滴无菌水；(8)药剂后处置：在步骤(7)处理过的叶片上部覆盖一张灭菌滤纸，在滤纸表面喷洒无菌水保湿，盖上皿盖，置于28℃培养箱中培养，在5‑10d内观察发病情况，统计、比较各组处理的发病率。