[发明专利]一种利用鸡蛋清生产溶菌酶晶体的方法在审
申请号: | 201810959893.0 | 申请日: | 2018-08-20 |
公开(公告)号: | CN108998436A | 公开(公告)日: | 2018-12-14 |
发明(设计)人: | 雷文彩;左文海;蒋有德 | 申请(专利权)人: | 雷文彩;雷晋宁;周启真;雷中国 |
主分类号: | C12N9/36 | 分类号: | C12N9/36 |
代理公司: | 北京中知法苑知识产权代理事务所(普通合伙) 11226 | 代理人: | 常玉明;张兰海 |
地址: | 644300 四川省*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 一种利用鸡蛋清生产溶菌酶晶体的方法,包括1)材料选择与预处理,2)吸附,3)洗脱,4)盐析,5)结晶等步骤,其特点是树脂:500g724树脂用氢氧化钠溶液50g浸泡1‑2小时,然后用蒸馏水冲洗至pH14;再用pH6.5的磷酸盐缓冲液浸泡8小时;聚丙烯酸:用少许磷酸盐缓冲液溶解分析纯为38%的聚丙烯酸;选择土陶罐、陶瓷或搪瓷容器。本发明将鸡蛋清直接应用于实际生产,生产的溶菌酶晶体具有质量稳定、感观良好、酶活性较高,且晶体产量高,在提高经济效益的同时还降低了生产成本。具检验测定,本发明生产的溶菌酶晶体活力达到68.81lu/mg,是现有技术生产出来的溶菌酶活力20lu/mg的3倍多。 | ||
搜索关键词: | 溶菌酶晶体 鸡蛋清 磷酸盐缓冲液 聚丙烯酸 树脂 生产 浸泡 预处理 氢氧化钠溶液 蒸馏水冲洗 材料选择 技术生产 搪瓷容器 质量稳定 分析纯 酶活性 溶菌酶 土陶罐 吸附 洗脱 盐析 生产成本 溶解 陶瓷 检验 应用 | ||
【主权项】:
1.一种利用鸡蛋清生产溶菌酶晶体的方法,其特征在于:a)原辅料配比:取相等重量的鸡蛋清和井水;b)按上述配比配料,将鸡蛋清和井水加入到搅拌器中,200~300rpm下搅拌20min,至稠度均匀即可,然后用纱布过滤,以除去残余蛋壳和少量蛋黄;c)将b)中搅拌好的料倒入经乙酸水溶液泡过的搪瓷容器内,再加入724树脂,放置2h以上,然后将弃去上清液,将724树脂用清水反复冲洗3次,晾干后移入下一个搪瓷容器;d)在c)所得的724树脂内加入1%~5%质量浓度的磷酸盐,搅拌洗脱30min后加等质量浓度的硫酸铵溶液,使溶菌酶与蛋清完全分离,再加水1kg,升温至40~50℃,保持15min,然后降温至5~8℃,滤出洗脱液至下一个搪瓷容器;e)将步骤d)中所得的洗脱液加入硫酸铵溶液和氯化钠,放置2h以上,以使溶菌酶从洗脱液中析出来;f)将步骤e)中所得的洗脱液中加入纯碱调pH值至10,再加入10%~15%质量浓度的聚丙烯酸,在5~8℃下放置一周;g)将步骤f)中沉淀出来的晶体晾干,获得溶菌酶晶体成品,于5~8℃下储存。
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