[发明专利]苹果砧木M9-T337的组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种苹果砧木M9‑T337的组培快繁方法，包括如下步骤：取M9‑T337茎尖作为外植体材料，清洗消毒后接种于诱导培养基上诱导出芽，诱导的芽在显微镜下剥出茎尖，再次消毒后转接到缓冲培养基上，诱导无菌芽，无菌芽转接到诱导丛生芽的培养基上培养，丛生芽分株转接到增殖培养基上培养，增殖苗大小分级后，转接到无糖培养盒中，25‑35天后出苗移栽。本发明的苹果砧木M9‑T337的组培快繁方法通过先进的组培生产技术生产M9‑T337组培苗，及利用无糖快繁技术进行生根练苗，可以加快M9‑T337产业优质高效发展。

主权项

1.一种苹果砧木M9‑T337的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）M9‑T337外植体选择与接种：取高5‑8cm、幼嫩的M9‑T337茎尖作为外植体材料；洗去表面的尘土，用洗洁精清洗20min，进而在流水下冲洗2h，最后用无菌水冲洗后置于超净工作台，进行消毒，消毒结束后，接种于诱导培养基上，诱导培养基配方为MS+6‑BA0.7mg/L+NAA0.1mg/L+2%‑3%蔗糖，每瓶接种3个外植体，置于培养室的培养架上诱导培养，20天诱导出芽；（2）茎尖脱毒：将步骤（1）诱导的芽在显微镜下剥出茎尖，再次消毒，消毒结束后将芽的茎尖转接到缓冲培养基上，诱导无菌芽，所述缓冲培养基配方为MS+6‑BA0.2mg/L+NAA0.01mg/L+2%‑3%蔗糖，培养40天；（3）丛生芽诱导：将步骤（2）培养的生长良好、经分子技术检测无菌、高2‑5cm的M9‑T337无菌芽转接到诱导丛生芽的培养基上，所述诱导丛生芽的培养基配方为MS+6‑BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+3%蔗糖，放置到培养室培养；（4）增殖扩繁：将步骤（3）培养的M9‑T337丛生芽分株转接到增殖培养基上，放置到培养室培养，30天后可再次转接；（5）生根培养：将步骤（4）培养的增殖苗按大小分级后，转接到无糖培养盒中，前3‑5天依靠所述无糖培养盒的容器本身的6个自然透气孔进行气体交换，3‑5天后人工强制向所述无糖培养盒的容器内通CO2气体，25‑35天后，可出苗移栽。