[发明专利]一种肉制品中卡博替尼药物残留的定量检测方法

摘要

本发明提供了一种肉制品中卡博替尼药物残留的定量检测方法，包括：样品制备；样品提取；样品净化；液相色谱‑串联质谱法分析检测；将液相色谱‑串联质谱检测所获得卡博替尼的峰面积代入下式进行计算，以获得待测液中卡博替尼的测定值；本发明填补了我国在肉制品中卡博替尼药物残留定量检测技术上的空白，且具有易于操作及检测准确性高的优点。

主权项

1.一种肉制品中卡博替尼药物残留的定量检测方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)样品制备：取代表性样品，用组织捣碎机充分捣碎，充分混匀，获得制备样，然后装入洁净容器密封，‑18℃以下冷冻保存，备用；(2)样品提取：从制备样中称取2g样品，精确至0.01g，加入15mL乙酸乙酯，旋涡混匀2min，然后4000r/min离心5min，取上清液，残渣继续用15mL乙酸乙酯重复提取，合并提取液，40℃水浴旋转蒸发至干；(3)样品净化：提取的样品中加入0.1mol/L盐酸3mL，旋涡混匀1min，收集溶解液，未溶解的残渣再加入0.1mol/L盐酸3mL，旋涡混匀1min，合并溶解液；溶解液中加入3mL正己烷，旋涡混匀1min，然后4000r/min离心5min，弃去正己烷层，再加入3mL正己烷，重复上述步骤，获得备用液；MCX固相萃取柱使用前依次用3mL甲醇和0.1mol/L盐酸2mL平衡，加入备用液，以1.0mL/min的流速全部通过固相萃取柱，再分别用0.1mol/L盐酸1mL、甲醇1mL、甲醇‑2％氨水10+90，v/v 1mL淋洗，弃去淋洗液，最后用5mL甲醇‑5％氨水60+40，v/v洗脱，收集洗脱液，于40℃水浴下氮气吹干，将吹干得到的物质用1mL 30％乙腈水溶液溶解，过0.2μm有机滤膜，得到待测液；(4)采用超高效液相色谱‑串联质谱法进行分析检测，以获得待测液中被测物即卡博替尼的响应值，根据待测液中被测物的响应情况选取响应值相应的标准工作液进行色谱分析，标准工作液设有包含零点在内的五个浓度梯度，且标准工作液和待测液中卡博替尼的响应值均应在仪器线性响应范围内，并同时设置空白对照；所述超高效液相色谱‑串联质谱的条件为：A.超高效液相色谱:色谱柱：Thermo Syncronnic C18柱，50mm×2.1mm，1.7μm；流速：0.3mL/min；进样量：10μL；柱温：30℃；梯度洗脱程序如下：B.质谱条件：离子源：电喷雾ESI，正离子；扫描方式：多反应监测MRM；雾化气、窗帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气；监测离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞气体能量、碰撞池出口电压如下：(5)将超高效液相色谱‑串联质谱检测所获得的卡博替尼的峰面积代入下式(1)进行计算，以获得待测液中卡博替尼的测定值；其中：X—试样中卡博替尼残留含量，mg/kg；A—待测液中卡博替尼的峰面积；As—标准工作溶液中卡博替尼的峰面积；c—标准工作溶液中卡博替尼浓度，mg/L；V—待测液最终定容体积，mL；m—试样的质量，g。