[发明专利]一种黄鳝抗菌肽的制备方法有效
| 申请号： | 201811010920.6 | 申请日： | 2018-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN108977457B | 公开（公告）日： | 2021-04-02 |
| 发明（设计）人： | 许巧情;汤东东;张锦丰;袁汉文;田光明;郜卫华 | 申请（专利权）人： | 长江大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/12;C07K14/46;A23K50/80;A23K20/147 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 代芳 |
| 地址： | 434000*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种黄鳝抗菌肽的制备方法，属于基因工程技术领域，所述方法包括以下步骤：1)将黄鳝抗菌肽基因与载体连接构建重组载体；2)将步骤1)中获得的重组载体转入到毕赤酵母中获得重组菌株；3)将重组菌株以0.5～1.5％接种体积接种到BMGY培养基中诱导培养46～50h获得培养液；4)收集培养液中的菌体细胞进行破碎，获得细胞破碎液，镍柱收集和纯化所述细胞破碎液获得黄鳝抗菌肽；所述黄鳝抗菌肽基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；所述菌体细胞采用蜗牛酶孵育后与Triton X‑100、PMSF混合在超声作用下实现破碎。所述方法获得的黄鳝抗菌肽表达量高、活性好，对多种细菌均有抑制作用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 黄鳝 抗菌 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种黄鳝抗菌肽的制备方法，包括以下步骤：1)将黄鳝抗菌肽基因与载体连接构建重组载体；2)将步骤1)中获得的重组载体转入到毕赤酵母中获得重组菌株；3)将重组菌株以0.5～1.5％接种体积接种到BMGY培养基中诱导培养46～50h获得培养液；4)收集培养液中的菌体细胞进行破碎，获得细胞破碎液，镍柱收集和纯化所述细胞破碎液获得黄鳝抗菌肽；所述黄鳝抗菌肽基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；所述菌体细胞采用蜗牛酶孵育后与Triton X‑100、PMSF混合在超声作用下实现破碎。
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