[发明专利]检测布鲁氏菌病的电化学免疫传感器的制备方法及其应用

摘要

本发明提供一种检测布鲁氏菌抗体的电化学免疫传感器的制备方法，属于电化学生物传感器技术领域。该方法包括：将玻碳电极预处理，通过电沉积的方法将金纳米粒子修饰到玻碳电极上，然后引入谷胱甘肽做为抗污材料，与金表面自组装，再使HA通过N‑(3‑二甲基氨基丙基)‑N'‑乙基碳化二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺有效地缀合到谷胱甘肽上，最后用赤藓糖醇封闭非特异性活性位点。本发明解决了现有布鲁氏菌病检测方法的准确性差、处理过程复杂等问题。本发明免疫传感器的电极界面具有优异的亲水性，复合界面的防污性能明显提高，具有超高灵敏度，较宽的线性范围和较低的检测限，且稳定性和重复性能好，操作简便；可应用于复杂生物样品中布鲁氏菌病抗体的检测。

主权项

1.一种检测布鲁氏菌病的电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将GCE进行预处理；(2)将预处理好的GCE电极在HAuCl4溶液中电沉积，然后用超纯水洗涤，氮气干燥，得到AuNPs/GCE；(3)将AuNPs/GCE浸入GSH溶液中，GSH修饰到AuNPs/GCE界面上，然后将该修饰电极在β‑巯基乙胺中浸泡以封闭未反应的AuNPs；(4)将HA用含有N‑(3‑二甲基氨基丙基)‑N'‑乙基碳化二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺的溶液活化，然后将GSH/AuNPs/GCE浸入上述溶液中得到HA/GSH/AuNPs/GCE；(5)将HA/GSH/AuNPs/GCE浸入1,4‑丁二醇二缩水甘油醚的碱性溶液中，再将该修饰电极在含有布鲁氏菌外膜蛋白OMP31的磷酸缓冲溶液中浸泡，得到OMP31/HA/GSH/AuNPs/GCE，然后用赤藓糖醇封闭非特异性活性位点，即制得电化学免疫传感器。