[发明专利]一种基于硅类介质微球超微量DNA提取纯化试剂盒在审
申请号: | 201811019041.X | 申请日: | 2018-09-03 |
公开(公告)号: | CN109280662A | 公开(公告)日: | 2019-01-29 |
发明(设计)人: | 叶志鹏;郑卫国;焦海涛;杨海峰;夏子芳;陈林丽;郭育林;刘伟 | 申请(专利权)人: | 海宁市公安局;上海锦博生物技术有限公司;无锡中德美联生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/6806 |
代理公司: | 上海骁象知识产权代理有限公司 31315 | 代理人: | 赵俊寅 |
地址: | 314499 浙江省嘉*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于硅类介质微球超微量DNA提取纯化试剂盒,包括有裂解、吸附、漂洗、洗脱四个部分,裂解部分主要针对除检材部分进行了优化,方便操作的同时最大限度地获得裂解产物,设计出离心管及配套的具有过滤功能的提篮;吸附部分的吸附增强剂,增加疏水作用,消除管壁静电效应,促进DNA和硅类介质微球表面基团作用,使得吸附效率大幅提高;洗脱部分的高效洗脱液,创新性地采用竞争洗脱原理,能够显著提高DNA洗脱效率,减少硅类介质微球表面DNA的残留。本案改良过的基于硅类介质微球超微量DNA提取纯化试剂盒,操作简单,提取的DNA得率高,纯度高、片段完整,综合以上特点尤其适合超微量生物检材DNA的提取,满足了日益提出的高检出率要求。 | ||
搜索关键词: | 介质微球 超微量 纯化试剂盒 洗脱 裂解 吸附 吸附增强剂 表面基团 创新性地 方便操作 过滤功能 静电效应 裂解产物 生物检材 疏水作用 吸附效率 表面DNA 离心管 配套的 洗脱液 漂洗 提篮 得率 管壁 检材 残留 改良 优化 | ||
【主权项】:
1.一种基于硅类介质微球超微量DNA提取纯化试剂盒,包括裂解部分、吸附部分、漂洗部分和洗脱部分,其特征在于,所述裂解部分包括离心管及配套的提篮,在提篮的底部设有滤膜,该滤膜在不离心的情况下依靠张力阻挡水分渗透;所述吸附部分包括结合缓冲液、硅类介质微球悬浮液、吸附增强剂,硅类介质微球的表面至少含有硅羟基,吸附增强剂的溶剂为水,溶质包括:质量浓度3~10%质子或非质子溶剂,80~120μg/mL外源添加的DNA短片段扩增产物;所述洗脱部分包括高效洗脱液,高效洗脱液的溶剂为水,溶质包括:5~20mM的Tris‑HCl、0.5~2mM螯合剂、0.1~5mM多价阴离子,pH 8.0~9.0。
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