[发明专利]一种诱导樱桃番茄花药获得再生植株的培养方法

摘要

本发明提供了一种诱导樱桃番茄花药获得再生植株的培养方法，包括以下步骤：（1）花蕾取材；（2）花蕾预处理；（3）花药胁迫处理；（4）花药胚状体诱导培养；（5）壮苗生根培养。本发明由花药离体培养直接诱导出胚状体，再经过壮苗生根培养获得再生植株，比常规的花药培养先脱分化形成愈伤组织，再分化成不定芽，最终获得再生植株的方法更简便易行，而且还能避免体细胞参与愈伤组织形成而出现的染色体倍性混杂现象。本发明可以诱导花药内部的小孢子发育为完整的单倍体或双单倍体植株，为樱桃番茄单倍体育种提供多种纯合的育种材料，大大提高育种效率，加快了育种进程，具有较高的应用价值。

主权项

1.一种诱导樱桃番茄花药获得再生植株的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）花蕾取材在樱桃番茄盛花期于晴天上午9:00‑11:00取材，采集长度为0.7‑0.9cm的花蕾，用冰盒带回实验室，筛选出小孢子处于单核靠边期的花蕾备用；（2）花蕾预处理将上述筛选出的花蕾置于密闭容器内于4℃放置1‑3d，然后进行表面消毒，得到预处理后的花蕾；（3）花药胁迫处理将花药从预处理后的花蕾中完整剥离、取出，去除花丝后腹面向下接种在诱导培养基上，于33‑35℃黑暗条件下培养2‑4d，得到胁迫处理后的花药；（4）花药胚状体诱导培养将上述接种了花药的诱导培养基置于温度24‑26℃、黑暗条件下培养28‑36d，可得到由裂开的花药壁内萌发出的胚状体；再将其置于温度24‑26℃、光照强度1000‑1500 Lx的条件下培养8‑15d，胚状体转绿后可发育成幼芽；（5）壮苗生根培养待上述幼芽生长到高度大于0.5cm时，将其转接至壮苗生根培养基中，置于温度23‑27℃、光照强度2000‑3000 Lx的条件下培养20‑30d，幼芽长大成苗，继续培养35‑45d得到再生植株。