[发明专利]一种人-15-羟基前列腺素脱氢酶过表达质粒的构建方法及其应用有效
申请号: | 201811031254.4 | 申请日: | 2018-09-05 |
公开(公告)号: | CN109182365B | 公开(公告)日: | 2022-05-10 |
发明(设计)人: | 李婉;卢春 | 申请(专利权)人: | 南京医科大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/66;A61K38/44;A61P35/00 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 曹翠珍 |
地址: | 211166 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 一种人‑15‑羟基前列腺素脱氢酶过表达质粒的构建方法及其应用。该构建方法包括如下步骤:以SEQ ID No:4‑5为引物,GenBank登录号NC_3248的SEQ ID No:1为模板,进行PCR扩增,获得目的基因;用限制性内切酶Xba I和BamH I对PCR产物和pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP载体进行酶切、纯化、连接,转化至大肠杆菌,即得质粒。与现有技术相比,本发明提供的HPGD在宫颈癌组织中呈现低水平表达,人为过表达宫颈癌细胞的HPGD,能够明显抑制细胞的增殖、迁移能力及恶性程度,因此,HPGD在宫颈癌发病过程中发挥重要作用,可作为诊疗宫颈癌的新的分子标记和药物靶点。 | ||
搜索关键词: | 一种 15 羟基 前列腺素 脱氢酶 表达 质粒 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种人‑15‑羟基前列腺素脱氢酶过表达质粒的构建方法,其特征在于,以SEQ ID No:4‑5为引物,GenBank登录号NC_3248的SEQ ID No:1为模板,进行PCR扩增,获得目的基因;用限制性内切酶Xba I和BamH I对PCR产物和pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP载体进行酶切、纯化、连接,转化至大肠杆菌,即得质粒。
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