[发明专利]一种pGEX–4T–V重组蛋白作为抗原包被ELISA板的试剂盒的建立方法在审
| 申请号： | 201811046537.6 | 申请日： | 2018-09-08 |
| 公开（公告）号： | CN108896770A | 公开（公告）日： | 2018-11-27 |
| 发明（设计）人： | 陆桂丽;黄炯;马文戈;苗书魁;王杰;沙依兰·卡伊扎;王延;杨学云 | 申请（专利权）人： | 新疆畜牧科学院兽医研究所（新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心) |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 西安研创天下知识产权代理事务所(普通合伙) 61239 | 代理人： | 杨凤娟 |
| 地址： | 830011 新疆维吾尔自治区乌鲁*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种pGEX–4T–V作为抗原包被ELISA板的试剂盒的建立方法，包括以下步骤：抗原包被浓度1:1500，37℃包被2小时，弃去液体PBST洗涤3次，3min/次；5%的脱脂奶粉300ul 37℃封闭1小时，弃去封闭液PBST洗涤3次，3min/次；加检测的羊血清1:100，37℃作用45min，弃去血清PBST洗涤3次，3min/次；抗羊二抗稀释浓度1:15000，100ul/孔，25℃作用45min，弃去液体PBST洗涤3次，3min/次；加TMB显色液100ul/孔，25℃作用3‑5min；2M硫酸终止液100ul/孔，450nm测定ELISA OD值。 | ||
| 搜索关键词： | 洗涤 抗原包被 试剂盒 血清 硫酸终止液 脱脂奶粉 重组蛋白 封闭液 稀释 包被 二抗 封闭 检测 | ||
【主权项】：
1.一种pGEX–4T–V作为抗原包被ELISA板的试剂盒的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：⑴抗原包被浓度1:1500，37℃包被2小时，弃去液体PBST洗涤3次，3min/次；⑵5％的脱脂奶粉300ul 37℃封闭1小时，弃去封闭液PBST洗涤3次，3min/次；⑶加检测的羊血清1:100，37℃作用45min，弃去血清PBST洗涤3次，3min/次；⑷抗羊二抗稀释浓度1:15000，100ul/孔，25℃作用45min，弃去液体PBST洗涤3次，3min/次；⑸加TMB显色液100ul/孔，25℃作用3‑5min；⑹2M硫酸终止液100ul/孔，450nm测定ELISAOD值。
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