[发明专利]一种基于LBL法修饰肝素分离细胞外囊泡的方法在审
| 申请号： | 201811054860.8 | 申请日： | 2018-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN109136164A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 张群;雷豪志;王煜蘅 | 申请（专利权）人： | 上海浦美医学科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/00 | 分类号： | C12N5/00 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 杨军 |
| 地址： | 201203 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于LBL法修饰肝素分离细胞外囊泡的方法。其具体步骤如下：(1)首先通过LBL层层修饰的方法，以静电吸附的原理，在若干带正电的纳米球上逐层交替修饰肝素和聚二烯丙基二甲基氯化铵PDADMAC；修饰层从内到外按照肝素、PDADMAC、肝素的顺序进行排列，修饰层的层数为大于等于三层的奇数层；(2)将修饰后的纳米球加入到含有细胞外囊泡的体液中反应5min‑120min后，离心或者磁吸附收集纳米球；(3)在收集的纳米球中加入氯化钠溶液反应，吸附在纳米球表面的细胞外囊泡洗脱到氯化钠溶液中，实现体液中细胞外囊泡的分离。本发明方法简单可靠、成本极低、灵活度大。 | ||
| 搜索关键词： | 纳米球 肝素 外囊 修饰 氯化钠溶液 分离细胞 体液 修饰层 细胞 聚二烯丙基二甲基氯化铵 层层修饰 静电吸附 磁吸附 灵活度 奇数层 三层 吸附 洗脱 | ||
【主权项】：
1.一种基于LBL法修饰肝素分离细胞外囊泡的方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)首先通过LBL层层修饰的方法，以静电吸附的原理，在若干带正电的纳米球上逐层交替修饰肝素和聚二烯丙基二甲基氯化铵PDADMAC；修饰层从内到外按照肝素、PDADMAC、肝素的顺序进行排列，修饰层的层数为大于等于三层的奇数层；(2)将修饰后的纳米球加入到含有细胞外囊泡的体液中反应5min‑120min后，离心或者磁吸附收集纳米球；(3)在收集的纳米球中加入2.0～2.5mol/L氯化钠溶液反应10～20min，吸附在纳米球表面的细胞外囊泡洗脱到氯化钠溶液中，通过离心或者磁吸附弃去纳米球，实现体液中细胞外囊泡的分离。
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