[发明专利]一种微孔反应板制备方法、试剂盒以及试剂盒的检测方法

摘要

本发明涉及一种微孔反应板制备方法、试剂盒以及试剂盒的检测方法，包括由下步骤：步骤1）将试剂所需数量的微孔反应板条平衡至室温；步骤2）将上述浓缩洗液和去离子水按1：20混合成工作洗涤液；步骤3）将标准品、质控品用纯化水按标示体积复溶；步骤4）向每孔中分别加入100～200μl复溶试剂；步骤5）然后依次加入25～100μl标准品、质控品或待测标本；振荡孵育10～30分钟；步骤6）采用上述的工作洗涤液洗板4‑6次，拍干；步骤7）向每孔中加入50～200μl增强液,缓慢振荡5min，于荧光读数仪内进行荧光计数。本发明降低了操作失误了及因配制容器引入引起污染的风险；示踪物制作成微球后置于微孔板中，装量无需富余，减少了试剂的浪费，降低试剂成本。

主权项

1.一种微孔反应板制备方法，其特征在于，所述的微孔反应板内部设置有示踪物微球，微孔反应板由以下步骤制成：步骤1）、将多孔微板空白板的微孔反应板制备成包被板；步骤2）、制备示踪物微球，将1mg~3mg目标抗原（抗体）加入1mg的Eu3+‑N2‑[P‑异氰酸‑苄基]‑二乙烯三胺四乙酸钠中混匀，25℃反应24h；步骤3）、反应液经Sephadex G－50柱（1×40cm）用50mmol/L、pH7.8的Tris‑HCl缓冲液洗脱，分离示踪结合物与游离Eu3+；步骤4）、采用全自动部分收集器1ml/管进行液体收集；步骤5）、于时间分辨荧光免疫分析仪上进行荧光计数，收集第一峰中荧光计数大于10000000的洗脱液,混匀后2~8℃保存；步骤6）、采用棋盘滴定法确定铕标记工作液浓度，然后用稀释液再按一定的比例稀释后进行冻干成微球，将冻干后的微球转移至步骤1）中包被板中，密封，再转移至铝塑袋中，于2~8℃中保存。