[发明专利]一种人脂肪干细胞条件培养基的制备方法在审
| 申请号： | 201811071100.8 | 申请日： | 2018-09-13 |
| 公开（公告）号： | CN109161521A | 公开（公告）日： | 2019-01-08 |
| 发明（设计）人： | 郑桂纯;陈志胜;赵姝灿;黄丽贞;张晓芳 | 申请（专利权）人： | 佛山科学技术学院 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 王国标 |
| 地址： | 528000 广东省佛山市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种人脂肪干细胞条件培养基的制备方法，其包括如下操作步骤：1)分离培养人脂肪干细胞；2)条件培养基制备：取传代培养中的P3至P6代次人脂肪干细胞，加入无血清培养基继续培养48h后收集细胞培养基上清液，对上清液进行离心处理20min，用0.22μm滤器过滤后获得人脂肪干细胞条件培养基。本发明的人脂肪干细胞条件培养基可以极显著地提高衰老的人皮肤成纤维细胞的活力，初步证实该条件培养基具有延缓皮肤衰老的作用，可将其应用于美容护肤品行业，且该条件培养基不含血清等复杂成分，在应用中降低了出现过敏反应的可能性，有利于在生产实际中的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 条件培养基 脂肪干细胞 制备 上清液 人皮肤成纤维细胞 无血清培养基 延缓皮肤衰老 应用 美容护肤品 细胞培养基 传代培养 分离培养 离心处理 血清 过敏 衰老 过滤 生产 | ||
【主权项】：
1.一种人脂肪干细胞条件培养基的制备方法，其特征在于包括如下操作步骤：1)分离培养人脂肪干细胞：取人脂肪组织，PBS溶液清洗、离心处理5min，取下层脂肪组织，加入Ⅰ型胶原蛋白酶溶液消化，离心处理，去除上层油脂和下层胶原酶溶液，然后用PBS溶液重悬沉淀，吹散后用200目细胞滤网过滤，离心处理10min，弃上清，加入完全培养基重悬，接种于培养板中传代培养；2)条件培养基制备：取传代培养中的P3至P6代次人脂肪干细胞，待人脂肪干细胞生长至75～85％培养基时，弃去培养基，PBS溶液清洗，加入无血清培养基继续培养48h后收集细胞培养基上清液，对上清液进行离心处理20min，用0.22μm滤器过滤后获得人脂肪干细胞条件培养基，4℃保存备用。
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