[发明专利]一种从土壤中筛选嗜酸耐重金属固氮菌的方法有效
| 申请号： | 201811081231.4 | 申请日： | 2018-09-17 |
| 公开（公告）号： | CN109055277B | 公开（公告）日： | 2021-09-24 |
| 发明（设计）人： | 冯银炉;孙庆业;邵佳;崔林钊 | 申请（专利权）人： | 安徽省交通航务工程有限公司;安徽大学;安徽建工集团控股有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/02;C12R1/065 |
| 代理公司： | 北京凯特来知识产权代理有限公司 11260 | 代理人： | 郑立明;李闯 |
| 地址： | 230011*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种从土壤中筛选嗜酸耐重金属固氮菌的方法，将酸性土壤与水混合进行振荡培养，并进行离心分离，弃去上清液，再加入无菌酸性培养液振荡培养，得到菌株混合液；取该菌株混合液作为接种菌。向所述接种菌中加入无菌酸性培养液，进行振荡培养，得到菌株培养液；取该菌株培养液作为接种菌，再以该接种菌重新执行该振荡培养，直至执行6次该振荡培养；吸取第四次、第五次和第六次该振荡培养得到的菌株培养液，并加入到固氮培养基中进行平板涂布培养和斜面培养菌，再进行菌株分离纯化，即得到纯化的嗜酸耐重金属固氮菌。本发明能够快速高效地筛选出适合酸性土壤的嗜酸耐重金属固氮菌，而且能够大幅提高菌株培养获得率和菌株的嗜酸耐重金属能力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 土壤 筛选 嗜酸耐 重金属 固氮菌 方法 | ||
【主权项】：
1.一种从土壤中筛选嗜酸耐重金属固氮菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤A、将酸性土壤与水混合，进行振荡培养，然后进行离心分离，弃去上清液，从而得到含混合菌株的沉淀物；步骤B、向所述含混合菌株的沉淀物中加入无菌酸性培养液，进行振荡培养，从而得到菌株混合液；取该菌株混合液作为接种菌；步骤C、将所述接种菌中与无菌酸性培养液混合，进行振荡培养，从而得到菌株培养液；取该菌株培养液作为接种菌，再以该接种菌重新执行步骤C，直至执行6次步骤C的振荡培养；步骤D、吸取第四次、第五次和第六次步骤C的振荡培养所得到的菌株培养液，并加入到固氮培养基中进行平板涂布培养，从而得到平板培养菌；步骤E、从承载所述平板培养菌的培养皿中，选取菌落数多于50的培养皿，并在固氮培养基中进行斜面培养，从而得到斜面培养菌；步骤F、对所述斜面培养菌进行菌株分离，得到嗜酸耐重金属固氮菌；步骤G、将所述嗜酸耐重金属固氮菌在固氮培养基中进行培养、纯化，从而得到纯化的活性嗜酸耐重金属固氮菌。
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