[发明专利]一种体外模拟胃肠淀粉消化的方法在审
申请号: | 201811081819.X | 申请日: | 2018-09-17 |
公开(公告)号: | CN109251959A | 公开(公告)日: | 2019-01-22 |
发明(设计)人: | 张妍;霍俊伟;谢佳璇;朱冠冰;秦栋;刘佩 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C12Q1/40 | 分类号: | C12Q1/40;C12Q1/37;G01N21/31;C12P19/14;C12P19/00 |
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地址: | 150030 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 一种体外模拟胃肠淀粉消化的方法属于体外模拟消化技术领域,该方法包括以下步骤:将磷酸缓冲液稀释,随后加入处理好的面条块,调节pH值,加入胃蛋白酶引发消化,加入碳酸钾终止消化,将浆液转移至透析袋中,加入胰腺α‑淀粉酶模拟小肠消化,用96孔板测定反应后的吸光度来衡量还原糖的含量。本发明采用小麦面条这一高GI(血糖生成指数)的大众主食来体外模拟面条的胃肠消化过程,结合高通量测定技术,相比较临床试验更快速、高效且低成本,适用于大量样品的测定或达到筛选的目的,为相关的食品研究提供一定的参考依据和技术手段,具有广泛的应用价值和发展前景。 | ||
搜索关键词: | 消化 模拟胃肠 种体 淀粉 淀粉酶 体外模拟消化 血糖生成指数 磷酸缓冲液 参考依据 技术手段 临床试验 模拟小肠 食品研究 体外模拟 胃肠消化 胃蛋白酶 小麦面条 低成本 高通量 还原糖 碳酸钾 透析袋 吸光度 胰腺 条块 稀释 主食 面条 筛选 衡量 应用 | ||
【主权项】:
1.一种体外模拟胃肠淀粉消化的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1))配置1L磷酸缓冲液(1M),用CaCl2进行10倍稀释,加入HCl/NaOH,将pH调节至6.9;(2)使用迷你搅拌器将生小麦面条搅拌成小面块,称重一定量的面条块并加入一定体积的磷酸缓冲液;(3)将小面块煮沸并冷却至室温,用1.0M HCl将浆液的pH调节至1.5,并加入一定量的胃蛋白酶引发消化;(4)将消化液在37℃水浴振荡器中振荡一定时间,消化结束后,向浆液中加入碳酸钾(1.0M),将pH调节至6.9使胃蛋白酶失活,然后将浆液转移至SnakeskinTM透析袋,截留分子量为7kDa;(5)向浆液中加入胰腺α‑淀粉酶来模拟小肠消化,将透析袋的两端密封并置于100mL磷酸缓冲液中,在37℃水浴振荡器振荡一定时间;(6)以不同的时间间隔取出等分试样的透析液,并立即用相同量的新鲜缓冲液进行替换;(7)在96孔板中加入一定比例的无酚DNSA试剂和取出的透析液并密封,在100℃下加热一定时间以产生红棕色,然后再冰水浴中冷却至室温;(8)将100μL混合物溶液转移到新的96孔板中,在540nm下测量吸光度以衡量透析液中还原糖的含量。
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