[发明专利]具有神经保护作用与消炎活性的山尖菜提取物的制备方法及用途

摘要

本发明公开了一种从山尖菜中提取的具有神经保护作用与消炎活性化合物的提取方法及其用途。提取方法包括以下步骤：山尖菜低温冷冻干燥后用乙酸乙酯浸提，浓缩后得到浸膏，再用硅胶、Sephadex LH‑20等色谱方法多次分离纯化得到化合物(R)‑(3‑(R)‑5‑羟基‑4‑甲基‑2‑氧代‑2，5‑二氢呋喃‑3‑基)‑3，4‑二甲基异苯丙呋喃(3H)‑酮，命名为山尖菜素A。经体外实验证实，山尖菜素A能够显著抑制β‑淀粉样蛋白25‑35对SH‑SY5Y细胞的损伤作用，可用于制备神经保护相关药物与防止阿尔茨海默症相关药物。同时，山尖菜素A对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应中NO的分泌具有明显的抑制作用，可用于制备抗炎相关药物。

主权项

1.一种从山尖菜中提取具有神经保护作用与消炎活性化合物的提取方法，所述提取方法包括如下步骤：(1)将山尖菜(全草)低温冷冻干燥后称取1Kg，粉碎；(2)室温下将冻干粉用乙酸乙酯浸提3次，每次7天，合并提取液后减压浓缩，得到山尖菜乙酸乙酯浸膏(28g)；(3)将山尖菜乙酸乙酯浸膏用甲醇溶解后，用56g 100‑200目硅胶拌样后旋干，在柱子中装入500g‑800g100‑200目硅胶，并加入拌好的样品后进行梯度洗脱，洗脱剂为石油醚：丙酮体系，洗脱比例依次为15∶1，10∶1，7∶1，5∶1，3∶1，2∶1，1∶1，分别得到Fr.1～Fr.7不同梯度洗脱物；(4)选取不同梯度洗脱物中各2～3瓶样品共计18瓶样品进行1H‑NMR测试，并进行分析，根据1H NMR提供的官能团结果以及TLC检识，将Fr.6(石油醚∶丙酮＝2∶1)洗脱部分经葡聚糖凝胶柱色谱进行除杂分离，所用凝胶填料为Sephadex LH‑20，凝胶柱规格100cm*1cm，洗脱剂为氯仿∶甲醇1∶1体系，根据薄层色谱分析，将颜色、Rf值相似的洗脱液合并后得到2个样品粗样，将得到的第1个样品粗样再次过硅胶柱并以二氯甲烷∶乙醇20∶1的体系进行洗脱，合并得到化合物。