[发明专利]医美级胎盘基蜕膜干细胞内液的制备方法

摘要

本发明公开了医美级胎盘基蜕膜干细胞内液的制备方法，具体为细胞应用技术领域。制备方法为：胎盘的选择，选择35‑40周新生儿盘状胎盘、一级胎盘；胎盘基蜕膜的分离、将含有庆大霉素的PBS缓冲液反复冲洗胎盘，用眼科剪取胎盘基蜕膜部分到培养皿中；选择超滤膜，将胎盘基蜕膜干细胞裂解液进行膜分离，在‑20℃冷冻储存，医美使用时室温融化。本方法具有易于操作，低免疫反应风险，活性高、效果明显等优点，并且有效利用医院医疗废物，制备成本低廉、可操作性强。突破皮肤吸收屏障，所述的医美级胎盘基蜕膜干细胞内液深度导入到皮下组织部位，迅速被肌肤组织吸收，发挥作用，从而产生疗效。

主权项

1.医美级胎盘基蜕膜干细胞内液的制备方法，其特征在于：所述的具体制备方法为：步骤一、胎盘的选择：选择35‑40周新生儿盘状胎盘、一级胎盘，采集产妇的外周血，采用ELASA方法检测乙肝、丙肝、梅毒、艾滋、EB病毒、嗜热T细胞病毒为阴性；步骤二、胎盘基蜕膜的分离、将含有庆大霉素的PBS缓冲液反复冲洗胎盘，用眼科剪取胎盘基蜕膜部分到培养皿中；步骤三、胎盘基蜕膜干细胞内液的制备，在GMP制备车间中将剪碎的胎盘基蜕膜放到50毫升离心管中，加入3毫升的3mg/ml的胶原蛋白酶I消化60分钟，加入DMEM/F12培养基终止消化，在2200rpm/min下离心5分钟，弃掉上清，在细胞沉淀中加入20毫升无血清细胞培养基中培养，每3天换液，第7‑15天，观察到梭形细胞长出，7‑8个克隆的时候可以传代、冻存；步骤四、医美级胎盘基蜕膜干细胞内液的制备方法：选择超滤膜，将胎盘基蜕膜干细胞裂解液进行膜分离，在‑20℃冷冻储存，医美使用时室温融化即可。