[发明专利]一种青霉素V酰化酶突变体、编码序列、重组表达载体、基因工程菌及应用有效

专利信息
申请号: 201811135223.3 申请日: 2018-09-28
公开(公告)号: CN109161540B 公开(公告)日: 2021-03-19
发明(设计)人: 黄斌;赵强;周晶辉;许岗 申请(专利权)人: 湖南福来格生物技术有限公司
主分类号: C12N9/84 分类号: C12N9/84;C12N15/55;C12N11/02;C12P37/06
代理公司: 长沙市融智专利事务所(普通合伙) 43114 代理人: 袁靖
地址: 410000 湖南省长*** 国省代码: 湖南;43
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摘要: 发明提供了一种青霉素V酰化酶突变体、编码序列、重组表达载体、基因工程菌及应用。对Bacillus sphaericus来源的青霉素V酰化酶进行突变,获得的突变体PVA‑3的比活提高了9倍,固定化活力由92U/g提高到820U/g,在浓度为30%的青霉素V钾盐条件下孵育1小时,活性残余89.1%;固定化突变体PVA‑3应用于pH6.0,25℃条件下裂解25%浓度的青霉素V制备6‑APA的反应时间由180分钟缩短到60分钟,底物转化率提高至99.5%以上,且连续使用600批次以上,活力无明显的损失,具有很好的操作稳定性。突变后的PVA‑3极大程度地降低了生产成本,提高了生产效率,更适合于工业化应用。
搜索关键词: 一种 青霉素 酰化酶 突变体 编码 序列 重组 表达 载体 基因工程 应用
【主权项】:
1.一种青霉素V酰化酶突变体,其特征在于,至少将具有SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第91位的苏氨酸突变成丙氨酸,优选将具有SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的青霉素V酰化酶第91位的苏氨酸突变成丙氨酸,优选的突变体命名为PVA‑1,其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
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