[发明专利]利用CRISPR-Cas9系统敲除甘蓝型油菜BnMAX1基因的方法及应用有效

专利信息
申请号: 201811137314.0 申请日: 2018-09-27
公开(公告)号: CN109266646B 公开(公告)日: 2021-03-16
发明(设计)人: 王汉中;华玮;郑明;杨红丽;张亮 申请(专利权)人: 中国农业科学院油料作物研究所
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20
代理公司: 武汉宇晨专利事务所 42001 代理人: 江丽丽;王敏锋
地址: 430000 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明公开了一种利用CRISPR‑Cas9系统敲除甘蓝型油菜BnMAX1基因的方法及应用,设计了两种特异性靶向甘蓝型油菜BnMAX1基因的sgRNA并制成oligo二聚体,与Cas9载体连接,通过农杆菌介导的遗传转化技术导入到甘蓝型油菜下胚轴愈伤并再生成苗,Cas9核酸酶在sgRNA的引导下,剪切目标序列,每条sgRNA都能通过CRISPR‑cas9系统介导A和C基因组上BnMAX1基因的剪切,达到基因敲除的目的。经过表型鉴定,发现纯合突变株系增加了分枝数、单株角果数,降低植株高度,同时也增加了产量。
搜索关键词: 利用 crispr cas9 系统 甘蓝 油菜 bnmax1 基因 方法 应用
【主权项】:
1.两种特异性靶向甘蓝型油菜BnMAX1基因的sgRNA,其特征在于,sgRNA‑1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,sgRNA‑2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
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