[发明专利]牙龈卟啉单胞菌诱导巨噬细胞外泌体RNA表达研究方法在审

专利信息
申请号: 201811147379.3 申请日: 2018-09-29
公开(公告)号: CN109207425A 公开(公告)日: 2019-01-15
发明(设计)人: 林莉;李琛;张冬梅;王宏岩;潘亚萍 申请(专利权)人: 中国医科大学附属口腔医院
主分类号: C12N5/0786 分类号: C12N5/0786;C12Q1/6883
代理公司: 沈阳东大知识产权代理有限公司 21109 代理人: 宁佳
地址: 110002 辽宁*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要: 发明的牙龈卟啉单胞菌诱导巨噬细胞外泌体RNA表达研究方法,步骤包括:1)将人单核细胞U937依次进行复苏、培养及诱导,获得巨噬细胞;2)将细菌P.gingivalis W83复苏;3)构建P.gingivalis W83感染巨噬细胞的体外炎症模型;4)分别提取P.gingivalis W83感染巨噬细胞前后释放的外泌体并进行鉴定;5)分别提取P.gingivalis W83感染巨噬细胞前后释放的外泌体总RNA,进行全转录组的高通量测序,筛选差异表达的mRNA、lncRNA、circRNA,进行整合分析。本发明首次研究了巨噬细胞在被牙龈卟啉单胞菌感染的模拟炎症过程中分泌的外泌体内RNA表达的变化,根据实验结果可为外泌体在牙周致病和免疫过程的进一步研究奠定良好的基础。
搜索关键词: 牙龈卟啉单胞菌 感染巨噬细胞 诱导巨噬细胞 巨噬细胞 研究 复苏 高通量测序 人单核细胞 差异表达 免疫过程 炎症过程 炎症模型 释放 转录组 构建 体外 整合 分泌 细菌 诱导 体内 筛选 感染 分析
【主权项】:
1.牙龈卟啉单胞菌诱导巨噬细胞外泌体RNA表达研究方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将人单核细胞U937依次进行复苏、培养及诱导,获得巨噬细胞;(2)将细菌P.gingivalis W83复苏;(3)构建P.gingivalis W83感染巨噬细胞的体外炎症模型;(4)分别提取P.gingivalis W83感染巨噬细胞前后释放的外泌体并进行鉴定;(5)分别提取P.gingivalis W83感染巨噬细胞前后释放的外泌体总RNA,进行全转录组的高通量测序,筛选差异表达的mRNA、lncRNA、circRNA,并结合GO和KEGG进行整合分析。
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