[发明专利]一种橙黄玉凤兰内生真菌的分离培养方法在审
申请号: | 201811147718.8 | 申请日: | 2018-09-29 |
公开(公告)号: | CN109294924A | 公开(公告)日: | 2019-02-01 |
发明(设计)人: | 陈兆贵;郑静敏;陈双庆;邓文言;连琼华 | 申请(专利权)人: | 惠州学院 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N1/02;C12R1/645 |
代理公司: | 惠州市超越知识产权代理事务所(普通合伙) 44349 | 代理人: | 陈文福;陈惠珠 |
地址: | 516000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及真菌分离培养技术领域,具体涉及一种橙黄玉凤兰内生真菌的分离培养方法,包括如下步骤:(1)取橙黄玉凤兰植株,洗净,风干;(2)将植株分解为主茎、叶片、根和块茎,并剪切成小段;(3)将小段用乙醇浸泡处理;(4)再用次氯酸钠浸泡处理;(5)吸干水分;(6)将根块、主茎、块茎和叶片分成小片,然后分别接种于含硫酸链霉素的PDA培养基中;(7)置于恒温培养箱中,培养。本发明的分离培养方法使用PDA培养基,采用硫酸链霉素选择出内生真菌,并在分离培养基上培养数日后,通过肉眼观察菌落形态进行真菌菌落形态观察,确定了菌株最适培养基和培养时间,为今后橙黄玉凤兰内生真菌的大批量培养奠定了基础。 | ||
搜索关键词: | 内生真菌 分离培养 硫酸链霉素 块茎 植株 小段 叶片 分离培养基 恒温培养箱 次氯酸钠 方法使用 菌落形态 形态观察 乙醇浸泡 真菌分离 真菌菌落 培养基 剪切 风干 菌株 吸干 洗净 主茎 接种 浸泡 分解 | ||
【主权项】:
1.一种橙黄玉凤兰内生真菌的分离培养方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)取橙黄玉凤兰植株,冲洗干净植物表面的沙土,用滤纸吸干植株表面的水分,置于有滤纸的干净培养皿中自然风干,然后转移至超净工作台;(2)将风干后的植株分解为主茎、叶片、根和块茎,并剪切成3~4cm长的小段;(3)将剪切后的小段用质量分数为65%‑75%的乙醇浸泡处理1~3min;(4)将乙醇浸泡后的小段取出,再用质量分数为2%‑3%的次氯酸钠浸泡处理1~2min;(5)将次氯酸钠浸泡后的小段取出,置于无菌吸水纸上吸干水分;(6)将吸干水分后的根块分为面积为0.5~1.0cm2的小薄片,主茎和块茎剪成0.5~1.0cm长的小段,叶片切成面积为0.5~1.0cm2的小片,然后分别接种于含20‑30μg/mL硫酸链霉素的PDA培养基中;(7)将接种后的PDA培养基置于27‑29℃恒温培养箱中,培养。
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