[发明专利]一种动态键水凝胶的制备方法及其在酶固定化方面的应用在审
| 申请号： | 201811157242.6 | 申请日： | 2018-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN109266638A | 公开（公告）日： | 2019-01-25 |
| 发明（设计）人： | 陈敬华;米哈伊尔·巴尔博尤;张燕;王睿 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N11/10 | 分类号： | C12N11/10;C12N11/08;C12N11/04;C08G12/06;C08G12/08 |
| 代理公司： | 大连理工大学专利中心 21200 | 代理人： | 梅洪玉;刘秋彤 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明一种动态键水凝胶的制备方法及其在酶固定化方面的应用，属于高分子材料领域。首先由芳香醛、氨基封端的聚合物以及含不同功能基团的胺，经亚胺生成反应聚合而成，并进一步与6‑氧‑羧甲基壳聚糖交联得到水凝胶。然后利用动态键水凝胶作载体，在制备过程中通过物理吸附法将靶点酶包裹于其中，实现酶的固定化。本发明与前期反应体系中动态键聚合物的直接添加相比，水凝胶固定化材料能显著增强酶的重复利用度。相对其他酶固定化材料，该方法简单易行，水凝胶的高含水量为酶提供了较好的外部催化环境，能较大程度维持固定化酶的体外活性。 | ||
| 搜索关键词： | 水凝胶 动态键 酶固定化 聚合物 制备 高分子材料领域 酶固定化材料 羧甲基壳聚糖 氨基 固定化材料 物理吸附法 催化环境 高含水量 功能基团 固定化酶 体外活性 直接添加 制备过程 重复利用 芳香醛 固定化 靶点 交联 亚胺 聚合 应用 外部 | ||
【主权项】：
1.一种动态键水凝胶在酶固定化方面的应用，其特征在于，具体应用方法如下：步骤一、制备浓度为50‑200mM的6‑氧‑羧甲基壳聚糖溶液100‑300μL，加入0.01‑1.0mg靶点酶，并分散均匀，进一步加入100‑400μL步骤2)所得动态键聚合物溶液，20‑60℃静置0.5‑6小时，得到动态键水凝胶包裹的固定化酶；步骤二、将固定化酶置于酶催化反应体系，加入酶的底物、溶液、辅助因子，观察产物生成情况，检测酶催化反应速率；与同等条件的自由酶催化比较，动态键水凝胶载体不仅能维持酶的活性，而且能够提高酶的重复可利用性。
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