[发明专利]一种猪蓝耳病灭活疫苗的制备方法在审

专利信息
申请号: 201811162675.0 申请日: 2018-09-30
公开(公告)号: CN109248314A 公开(公告)日: 2019-01-22
发明(设计)人: 徐高骁 申请(专利权)人: 南宁学院
主分类号: A61K39/12 分类号: A61K39/12;A61K39/39;A61P31/14;C12N5/071;C12N7/00;C12N7/02
代理公司: 贵阳睿腾知识产权代理有限公司 52114 代理人: 谷庆红
地址: 530200 广西*** 国省代码: 广西;45
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摘要: 发明属于养殖技术领域,尤其是一种猪蓝耳病灭活疫苗的制备方法,包括以下步骤:(1)在MEM基础培养基中加入新生牛血清、中药提取液配制成培养液;(2)使用培养液对Marc‑145细胞进行驯化培养,得到Marc‑145细胞培养液;(3)将猪蓝耳病毒液解入到Marc‑145细胞培养液培养得到病毒液;(4)将病毒液进行澄清、分离、浓缩、纯化;(5)将纯化的病毒液灭活后,与中药提取液配置成灭活疫苗。本发明所使用的中药提取液由茯苓、蒲公英、黄芪、艾草、玉米须、菟丝子、白术、刺五加、淫羊藿制成,能提T细胞、B细胞等细胞因子的活性,促进机体产生抗体。因此,本发明使用中药提取液驯化培养Marc‑145细胞、配置灭活疫苗,能有效提高灭活疫苗对免疫系统的刺激性。
搜索关键词: 灭活疫苗 中药提取液 培养液 细胞培养液 驯化培养 病毒液 蓝耳病 制备 种猪 细胞 病毒液灭活 基础培养基 新生牛血清 猪蓝耳病毒 茯苓 免疫系统 细胞因子 蒲公英 黄芪 刺五加 淫羊藿 玉米须 菟丝子 艾草 白术 抗体 配置 液解 澄清 浓缩 养殖
【主权项】:
1.一种猪蓝耳病灭活疫苗的制备方法,包括以下步骤:(1)培养液的配制:在MEM基础培养基中加入新生牛血清、中药提取液配制成培养液A和培养液B;(2)细胞培养:将Marc‑145细胞复苏后,接入到培养液A中进行培养,待Marc‑145细胞长成单层后;从单层细胞中选择无污染、形态正常的Marc‑145细胞接入到培养液B中继续培养,待细胞长到培养液表面的75%~80%时,即得Marc‑145细胞培养液;(3)病毒培养:将猪蓝耳病毒液接入到Marc‑145细胞培养液中,继续培养至85%以上细胞出现CPE后,收获培养病毒液;(4)纯化:将收获的病毒液采用中空纤维柱进行澄清、微滤、浓,80‑100倍后,采用分子筛层析柱对滤液进行纯化;(5)灭活:采用β‑丙内酯灭活纯化的病毒液后,加入5%左右的中药提取液混合配置成灭活疫苗。
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