[发明专利]检测奶牛CCL28基因单核苷酸多态性的试剂盒及RFLP方法及相关SNPs在审
| 申请号： | 201811169401.4 | 申请日： | 2018-10-08 |
| 公开（公告）号： | CN109022599A | 公开（公告）日： | 2018-12-18 |
| 发明（设计）人： | 张晓建;姚竞杰;白跃宇;赵俭;张伟;王三虎;郭利亚;吕亚南;安志兴;韦光辉 | 申请（专利权）人： | 河南科技学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/683;C12N15/11 |
| 代理公司： | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人： | 李振瑞 |
| 地址： | 453003 河南省*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明属于分子遗传学领域，具体涉及一种检测奶牛CCL28基因单核苷酸多态性的试剂盒及RFLP方法及相关SNPs。该RFLP方法以奶牛基因组DNA为模板，PCR扩增奶牛CCL28基因片段，通过创造酶切位点消化PCR扩增产物，再对酶切后的片段进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，根据电泳结果鉴定CCL28基因3个位点的单核苷酸多态性，并确定三个位点形成的单倍体型与奶牛乳腺炎的抗病性状相关。本发明利用在DNA水平上检测奶牛CCL28基因SNPs的RFLP方法简单、快速、成本低，且该试剂盒可用于中国荷斯坦奶牛乳腺炎抗病标记辅助选择，以便建立稳定的抗乳腺炎奶牛群。 | ||
| 搜索关键词： | 奶牛 单核苷酸多态性 试剂盒 基因 乳腺炎 个位 聚丙烯酰胺凝胶电泳 分子遗传学领域 中国荷斯坦奶牛 标记辅助选择 奶牛乳腺炎 基因组DNA 单倍体型 电泳结果 基因片段 抗病性状 酶切位点 种检测 检测 可用 酶切 抗病 消化 | ||
【主权项】：
1.一种检测奶牛CCL28基因单核苷酸多态性的试剂盒，其特征在于，包括引物对P1、P2、P3，2×Taq PCR Masster Mix，灭菌超纯水，限制性内切酶Kpn Ⅰ、HindⅢ、Sal Ⅰ，10×Quick Cut Buffer；引物对P1的上游引物F1序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物R1序列如SEQ ID NO.2所示；引物对P2的上游引物F2序列如SEQ ID NO.3所示，下游引物R2序列如SEQ ID NO.4所示；引物对P3的上游引物F3序列如SEQ ID NO.5所示，下游引物R3序列如SEQ ID NO.6所示。
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