[发明专利]甲胎蛋白双极电极纸芯片电致化学发光传感器的构建

摘要

本发明公开了一种甲胎蛋白双极电极纸芯片电致化学发光传感器的构建方法，属于生物传感器领域。在纸基基底上利用丝网印刷技术印刷碳浆作为驱动电极；通过化学原位生长法生长金纳米粒子制备双极电极，双极电极阴极固定甲胎蛋白一抗，钯金双金属纳米材料标记于甲胎蛋白二抗，利用夹心免疫方式识别捕获甲胎蛋白，双极电极阳极信号池中加入三联吡啶钌和三丙胺，测定起电致化学发光强度，构建了一种低成本、操作简单及背景干扰小的传感器。

主权项

1.一种甲胎蛋白双极电极纸芯片电致化学发光传感器的构建，其特征在于，制备步骤为：（1）在计算机上利用Adobe illustrator软件设计双极电极纸芯片的亲疏水蜡打印图案，如附图1所示；（2）将步骤（1）中设计的打印图案通过蜡打印机打印在色谱纸上，随后将打印过的A4色谱纸放置到平板加热器或烘箱中，在100 ºC下加热100 s，使蜡融化并浸透整个纸的厚度，形成疏水墙；（3）将步骤（2）中获得的纸芯片的通过丝网印刷技术印刷导电碳浆，制备驱动电极；（4）将步骤（3）中获得的纸芯片双极电极区域生长金纳米颗粒，制备双极电极纸芯片；（5）将步骤（4）中制得的纸芯片双极电极阴极区域滴加10~20 μL 10 μg/mL的甲胎蛋白捕获抗体溶液，室温孵育20~30分钟，用超纯水清洗三次；（6）将步骤（5）中得到的纸芯片双极电极阴极区域滴加10~20 μL 100 μg/mL牛血清白蛋白溶液，室温孵育20~30分钟，用超纯水清洗三次；（7）将步骤（6）中得到的纸芯片双极电极阴极区域滴加10 μL 10 pg/mL ~ 200 ng/mL的一定量甲胎蛋白标准溶液，室温孵育20~30分钟，用超纯水清洗三次；（8）将10 μL 5~10 mg/mL的Ab2/PdAu二抗复合物溶液滴加至步骤（7）中获得的双极电极阴极区域，室温孵育20~30分钟，用超纯水清洗三次，制得甲胎蛋白双极电极纸芯片电致化学发光传感器；（9）将步骤（8）中得到的纸芯片双极电极阳极区域信号池内加入50 μL 0.1 mol/L的磷酸缓冲溶液含有2.0~5.0 mmol/L 三联吡啶钌Ru(bpy)32+和30~50 mmol/L 三丙胺TPA，纸芯片双极电极阴极区域反应池内滴加50 μL 30~50 mmol/L的H2O2溶液，在驱动电极间施加4.0~6.0 V电压，测定信号池电致化学发光强度。