[发明专利]在食气梭菌基因组上快速整合大片段DNA的方法有效
申请号: | 201811174829.8 | 申请日: | 2018-10-09 |
公开(公告)号: | CN111019873B | 公开(公告)日: | 2022-08-19 |
发明(设计)人: | 黄鹤;柴常升;姜卫红;顾阳 | 申请(专利权)人: | 安徽吐露港生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/113;C12N15/90;C12R1/145 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 徐迅;崔佳佳 |
地址: | 239000 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明提供了一种在食气梭菌基因组上快速整合大片段DNA的方法。具体地,本发明包括步骤:(i)提供一待整合的宿主细胞,所述的宿主细胞的基因组中在待整合的位点处含有外源的attB序列;(ii)将含外源基因的整合构建物引入所述宿主细胞,从而在所述宿主细胞的基因组的待整合位点进行定位重组,从而获得经整合处理的宿主细胞;其中,所述的整合构建物为环状结构,并且包括:ФCD27整合酶的表达盒、ФC31整合酶的表达盒、外源基因的表达盒、ФCD27的attP序列和ФC31的attP序列,其中,ФCD27的attP序列和ФC31的attP序列分别位于外源基因的两侧。本发明方法可以高效、稳定地将大片段DNA整合入杆菌的基因组上。 | ||
搜索关键词: | 食气梭菌 基因组 快速 整合 片段 dna 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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