[发明专利]基于KASP技术检测κ-酪蛋白基因型的方法在审
| 申请号： | 201811181116.4 | 申请日： | 2018-10-10 |
| 公开（公告）号： | CN109321639A | 公开（公告）日： | 2019-02-12 |
| 发明（设计）人： | 赵凤;刘林;杨宇泽;路永强;常卓;赵春颖;吕小青;赵凤茹 | 申请（专利权）人： | 北京奶牛中心;北京市畜牧总站 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 北京汇智英财专利代理事务所(普通合伙) 11301 | 代理人： | 郑玉洁 |
| 地址： | 100192 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于KASP技术检测κ‑酪蛋白基因型的方法，包括如下步骤：制备DNA样品；制备好PCR扩增体系；进行PCR扩增；PCR扩增体系中的混合引物包括三种KASP引物：上游突变基因引物、上游未突变基因引物以及下游引物，并且，上游突变基因引物及上游未突变基因引物中，一条设计有HEX荧光标签序列，另一条设计有FAM荧光标签序列；根据PCR扩增后DNA样品的荧光强度，进行基因分型。本发明实现了对奶牛中CSN3三种常见变异体的全面筛选，可充分利用基因检测等领域的资源与技术优势培育优质种牛，发掘奶牛特色种质资源，为牧场选择合适的奶牛，提高乳蛋白率，从种源解决相关领域的技术瓶颈，对奶牛良种产业健康发展具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 引物 突变基因 奶牛 上游 酪蛋白基因 技术检测 制备 标签序列 混合引物 基因分型 基因检测 技术瓶颈 技术优势 下游引物 荧光标签 种质资源 重要意义 变异体 乳蛋白 荧光 种源 牧场 筛选 培育 健康 | ||
【主权项】：
1.一种基于KASP技术检测κ‑酪蛋白基因型的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤S1：制备DNA样品；步骤S2：制备好PCR扩增体系，其中，该扩增体系内包括50％体积分数的DNA样品、1.2‑1.6％体积分数的混合引物，以及余量的KASP混合液；步骤S3：进行PCR扩增；其中，步骤S2中添加的混合引物包括三种KASP引物，分别为上游突变基因引物、上游未突变基因引物以及下游引物，并且，上游突变基因引物及上游未突变基因引物中中，一条设计有HEX荧光标签序列，另一条设计有FAM荧光标签序列,以通过根据PCR扩增后DNA样品的荧光强度，进行基因分型。
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