[发明专利]流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法

摘要

本发明提供了一种流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法，所述方法包括以下步骤：1)利用互相关算法对荧光信号相对于散射光信号的时延进行估计，并对电路系统引入的时延进行校正，得到荧光信号相应的荧光寿命，2)利用得到的荧光寿命τ1，τ2对检测到的类高斯脉冲信号进行人为调制，利用相移特征对时延量进行表征，3)引入具有特定相移特性的参考信号，实现原始脉冲信号的频谱迁移，并经过低通滤波实现光谱重叠影响的消除。

主权项

1.一种流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法，所述方法包括以下步骤：1)利用互相关算法对荧光信号相对于散射光信号的时延进行估计，并对电路系统引入的时延进行校正，得到荧光信号相应的荧光寿命，所述互相关算法的公式为：其中，fs为散射光信号；fla，flb为光谱重叠后检测到的荧光信号，K1，C1，D1为实际荧光信号强度；t0为fs的中心点位置；t0’为散射光信号未经过电路系统之前的中心点位置；τ1，τ2为fl1，fl2的荧光寿命；h0(t),h1(t),h2(t)分别为fs，fl1，fl2电路系统传递函数；K0，C0，D0为荧光信号强度；Δta,Δtb为fla，flb相对于fs的时延；t为时间，σ为标准差；2)利用得到的荧光寿命τ1，τ2对检测到的类高斯脉冲信号进行人为调制，利用相移特征对时延量进行表征，所述进行人为调制的方法如下述公式：其中，K2，C2，D2为调制后的荧光信号强度；φ1，φ2为人为引入的相移，用于对时延特性进行表征，φ1＝ω0*τ1，φ2＝ω0*τ2；ω0为调制频率；t为时间，σ为标准差；3)引入具有特定相移特性的参考信号，实现原始脉冲信号的频谱迁移，并经过低通滤波实现光谱重叠影响的消除，其中，引入具有特定相移特性的参考信号通过如下公式来实现：其中，φ_ref1，φ_ref2为参考信号的相位，φ_ref1＝φ₂，φ_ref2＝φ₁，t为时间；经过低通滤波实现光谱重叠影响的消除通过如下公式来实现：其中，t为时间，σ为标准差。