[发明专利]一种凝结芽孢杆菌液体发酵产β-半乳糖苷酶的方法有效
申请号: | 201811183549.3 | 申请日: | 2018-10-11 |
公开(公告)号: | CN109182307B | 公开(公告)日: | 2021-07-23 |
发明(设计)人: | 郭庆文;刘文龙;王兴吉;郭庆亮;王克芬;张杰 | 申请(专利权)人: | 山东隆科特酶制剂有限公司 |
主分类号: | C12N9/38 | 分类号: | C12N9/38;C12N1/20;C12R1/07 |
代理公司: | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人: | 栗华楠 |
地址: | 276400 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明属于发酵工程技术领域,特别涉及一种凝结芽孢杆菌液体发酵产β‑半乳糖苷酶的方法及其所产β‑半乳糖苷酶。所述凝结芽孢杆菌具体为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)突变株BR‑171,保藏号为CGMCC No.14413。该菌株能够稳定、高效产β‑半乳糖苷酶,通过50L发酵罐液体深层发酵,同时经补料发酵培养84h,产酶可达4000u/ml以上。所述菌株生产的β‑半乳糖苷酶最适反应pH为5.0,在β‑半乳糖苷酶pH2.5~8.5范围内仍具有80%以上的活力,该酶的pH耐受性范围适合大部分乳制品;β‑半乳糖苷酶最适作用温度为60℃,在65℃下保温2h后剩余酶活仍达到88.4%,具有显著的耐热性;在乳制品行业具有较高的工业价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 凝结 芽孢 杆菌 液体 发酵 半乳糖 方法 | ||
【主权项】:
1.一种发酵制备β‑半乳糖苷酶的方法,其特征在于,具体如下:(1)一级种子罐培养:将种子液以3.5%接种量接入一级种子罐,培养温度32‑36℃,搅拌速度200‑400rpm,通风量1:1‑2,罐压0.05MPa,培养时间10‑20小时;(2)发酵培养:将一级种子罐菌种以5‑10%接种量接入发酵罐,培养温度32‑36℃,搅拌速度200‑700r/m,通风量1:1‑3,罐压0.05MPa,溶解氧15‑30%,pH7.0‑7.2;培养时间70‑100h;补料控制:当发酵液中的还原糖含量至5mg/mL‑8mg/mL时,开始添加补料培养基,补料量使发酵液还原糖含量维持为2mg/mL‑5mg/mL;放罐标准:60‑80%菌体衰老自溶,酶活力增长缓慢;发酵菌种为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)BR‑171,保藏号为CGMCC No.14413。
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