[发明专利]一种用于全血T淋巴细胞的免疫磁珠的制备方法及其应用在审
| 申请号： | 201811187957.6 | 申请日： | 2018-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN109239323A | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 肖忠党;叶正;孙博;邓媛媛;廖家洁;刘心怡;魏嘉莉;郭士成 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | G01N33/50 | 分类号： | G01N33/50;G01N33/543;G01N33/569;C12N5/0783 |
| 代理公司： | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人： | 景鹏飞 |
| 地址： | 210096 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于全血T淋巴细胞的免疫磁珠的制备方法及其应用；包括以下步骤：1）捕获T淋巴细胞的抗体、辅助T淋巴细胞扩增的抗体和偶联剂进行偶联反应；2）将免疫磁珠加入偶联抗体中孵育，得到含有偶联抗体的免疫磁珠，洗涤备用；3）从全血中提取样本细胞，洗涤备用；4）加入含有偶联抗体的免疫磁珠进行孵育；5）洗涤孵育完成的免疫磁珠，弃上清，得到纯化的全血T淋巴细胞；6）将得到纯化的全血T淋巴细胞转移到培养液中，完成全血T淋巴细胞的特异性扩增；本发明采用免疫磁珠法细胞分选扩增技术，利用抗体偶联磁珠实现对全血T细胞的特异性捕获和分选，简单操作便能快速实现全血T淋巴细胞的分离扩增，易于实现自动化。 | ||
| 搜索关键词： | 全血 免疫磁珠 偶联抗体 孵育 抗体 扩增 洗涤 制备 捕获 备用 培养液 辅助T淋巴细胞 免疫磁珠法 特异性扩增 偶联反应 细胞分选 样本细胞 偶联剂 磁珠 分选 偶联 应用 自动化 | ||
【主权项】：
1.一种用于全血T淋巴细胞的免疫磁珠的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括如下步骤：1）将捕获T淋巴细胞的抗体、辅助T淋巴细胞扩增的抗体和偶联剂进行偶联反应一定时间，得到偶联抗体；2）洗涤步骤1）得到的偶联抗体，将免疫磁珠加入偶联抗体中孵育一定时间，得到含有偶联抗体的免疫磁珠；3）洗涤步骤2）得到的含有偶联抗体的免疫磁珠，保存备用；如权利要求1所述的用于全血T淋巴细胞的免疫磁珠的制备方法，其特征在于，所述的免疫磁珠优选基磁珠、环氧基磁珠、甲苯磺酰基磁珠、聚丙烯酸磁珠中的一种；免疫磁珠的粒径范围为500～1000nm。
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