[发明专利]分散固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定蜂王浆中双甲脒及代谢产物残留量的方法

摘要

本发明涉及蜂王浆中双甲脒及其3种代谢产物残留量测定的方法，尤其涉及分散固相萃取‑液相色谱‑质谱/质谱法同时测定蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量的方法。该方法在试样中加入pH=9的缓冲溶液稀释后用乙腈、氯化钠沉淀蛋白、提取、盐析，通过含有N‑丙基乙二胺（PSA）、无水硫酸镁和C18粉末的吸附剂进行分散固相萃取对提取液进行净化，采用液相色谱‑质谱/质谱仪检测，同位素内标稀释内标法定量。该方法绿色友好、简便快捷，消耗资源小，检测成本低，方法灵敏度能满足蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量的检测和确证要求。

主权项

1.分散固相萃取‑液相色谱‑质谱/质谱法同时测定蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量的方法，所述的代谢产物为单甲脒，2,4‑二甲基苯基甲酰胺和2,4‑二甲基苯胺，其特征在于，该方法包括以下的步骤：一、提取：称取蜂王浆试样2.0g于50mL聚塞离心管中，加入同位素内标，加入pH＝9的缓冲溶液至10mL，2000转/分钟，涡旋混匀，静置5分钟，加10mL乙腈，2g氯化钠，2000转/分钟，涡旋混匀，8500转/分钟离心5分钟，移取乙腈提取液，水相中再加入10mL乙腈重复提取一次，合并乙腈提取液，并定容至20mL，取1.0mL乙腈溶液待净化；二、净化将上述乙腈提取液1.0mL，转移至15mL聚塞离心管中，涡旋，混匀，高速离心，转移全部上清液，加入水定容至2.0mL，涡旋，混匀，过0.22μm滤膜，待液相色谱‑质谱/质谱仪测定；聚塞离心管内含混合均匀的吸附剂：25mg N‑丙基乙二胺PSA、30mg无水硫酸镁和10mg C18粉末；三、测定3.1标准工作液和样品溶液在设定的液相色谱‑质谱/质谱条件下进样，以质量浓度X为横坐标，峰面积的比值Y为纵坐标，绘制6点标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中各化合物的响应值应在仪器检测的线性范围内；3.2在上述色谱条件下，判断样品中是否存在相应的被测物，需要满足如下条件：样品溶液中出现的质量色谱峰保留时间与混合基质标准工作液一致，允许偏差小于±2.5％，该色谱峰所对应的化合物在设定的质谱定性离子的相对丰度与浓度相当的混合基质标准工作液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过设定的规定，则可确定含有该化合物。