[发明专利]一种油菜组织培养快速繁殖及壮苗的方法

摘要

本发明公开了一种油菜组织培养快速繁殖及壮苗的方法，具体包括将甘蓝型油菜Polima CMS恢复系627R、621R、616R油菜种子发芽后进行无菌苗的下胚轴或油菜子叶的预培养后在进行分化培养，每次培养都适用特定的培养基，得到不定芽后再置于添加有矮壮素的培养基中进行培养，得到壮苗。本发明所述方法实用性强，大幅提高油菜组织的繁殖速度，有利于不定芽的根须生长，得到强壮幼苗，建立和优化了恢复系油菜的快繁再生体系，可快速获得具有优良性状的油菜新种质。

主权项

1.一种油菜组织培养快速繁殖及壮苗的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：1)发芽：挑选饱满、大小均匀和无病虫害的油菜种子，用75％酒精消毒1‑2min，0.1％升汞消毒7‑10min，再用无菌水冲洗3‑5次，在无菌滤纸上晾干后，播种到1/2MS培养基上，在20‑30℃，12h光照和12h黑暗交替的条件下发芽；2)油菜组织的预培养，切取步骤1)中培养6天的无菌苗的下胚轴或油菜子叶，置于预培养基M1中培养2‑5天；所述预培养基M1为：在MS培养基中，添加有0.5‑2.0mg/L 2,4‑D、0.5‑1.0mg/L 6‑BA、25‑35g/L蔗糖、6‑10g/L琼脂；所述预培养基M1的PH值为5.8‑5.9；3)油菜组织的分化培养，将步骤2)中经过预培养的下胚轴或油菜子叶转移到分化培养基M2‑N或M2‑I中培养25‑35天，得到不定芽；所述分化培养基M2‑N为：在MS培养基中，添加有2.5‑3.5mg/L 6‑BA、0.5‑1.5mg/LNAA、4‑6mg/L AgNO3、25‑35g/L蔗糖、6‑10g/L琼脂；所述分化培养基M2‑N的PH值为5.8‑5.9；所述分化培养基M2‑I为：在MS培养基中，添加有2.5‑3.5mg/L 6‑BA、0.5‑1.5mg/L IAA、4‑6mg/L AgNO3、25‑35g/L蔗糖、6‑10g/L琼脂；所述分化培养基M2‑I的PH值为5.8‑5.9。