[发明专利]一种高通量两系不育系选育的方法

摘要

本发明公开了一种高通量两系不育系选育的方法，包含：(1)以携带光温敏核不育基因的水稻为受体，与含有目标性状基因的水稻为供体，杂交得F1代种子，种植，单株自交，得F2代种子；(2)将F2代穴盘密植，控制单株分蘖个数；(3)待进入幼穗分化期时，低温处理，进入育性敏感期时低温连续处理后适温生长；(4)待抽穗时，无可染花粉的单株保留，割兜留桩，再生穗抽穗；(5)进入育性敏感期低温处理后适温生长，自交结实；(6)收获F3代种子，重复步骤(2)‑(5)，以使收获的种子的光温敏核不育基因纯合；(7)进行田间农艺性状选择。本发明的方法使不育基因迅速纯合稳定，工序短，可全年育性筛选，提高了工作效率。

主权项

1.一种高通量两系不育系选育的方法，其特征在于，该方法包含：(1)以携带光温敏核不育基因的水稻为受体材料，与含有目标性状基因的水稻为供体材料，两者杂交得到F1代种子，种植所述F1代种子，并进行单株自交，获得F2代种子；(2)将F2代种子经消毒、浸种、催芽后，播种在穴盘中密植，灌水施肥，置于28～32℃环境下生长，防虫防病，并控制单株分蘖个数；(3)待所述穴盘中的F2代群体水稻植株生长进入幼穗分化期时，开启冷水循环系统，设定冷水温度为22.5～23.5℃，当群体植株开始进入育性敏感期时，将所述穴盘放入冷水循环系统，使用设定的冷水温度进行冷水低温处理若干天，将所述穴盘移出所述冷水循环系统，在适温生长；(4)待抽穗时，开始观察筛选：对于花药有花粉散出的单株，直接拔除；对于目测没有花粉产生的单株，则取穗支梗进行花粉育性显微镜下观察，在碘化钾染色下镜检，对经过镜检观察发现有可染花粉的单株，直接拔除，无可染花粉的单株保留，则割兜留桩，在25～32℃温度下待再生穗抽穗；(5)在适温环境下，待再生幼穗将进入育性敏感期时，将割兜水稻的穴盘移入设定温度为19～22℃的冷水池系统，低温处理若干天，再转移到25～32℃无风环境，待抽穗自交结实；(6)将所述结实的种子收获，混合，得到F3代种子，重复步骤(2)‑(5)，经过2轮连续的低温筛选，收获F4代种子，F4代种子的光温敏核不育基因已纯合，育性起点温度已经稳定；(7)播种F4代种子，栽插到大田，观察田间表现，进行田间农艺性状选择，根据单株的农艺性状，依据农艺目标性状保留中标单株，割兜，在所述冷水循环系统19～22℃低温处理，进行单株自交繁种，收获F5代种子；(8)播种F5，从F5代起重复步骤(7)，连续进行2～3个世代的大田农艺性状选择，择优选定单株或者家系；(9)在数个世代的大田农艺性状选择结束后，将最后定型世代的种子进行原种扩大繁殖，得到生产用种。